Estudios bioquímicos e inmunológicos de proteínas biotiniladas en trypanosoma cruzi

• Autores: María Carolina Fernández Ramos
• Directores de la Tesis: Antonio Osuna Carrillo de Albornoz (dir. tes.), José Antonio Lupiáñez Cara (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Granada ( España ) en 2004
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Ignacio Navarrete López-Cózar (presid.), Rafael Jiménez (secret.), Francoise Petavy (voc.), María Teresa Galán Puchades (voc.), Antonio Manuel Almendros Gallego (voc.)
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• Resumen

  • La Tripanosomiasis Americana (enfermedad de Chagas), es una infección protozoaria causada por el flagelo llamado Trypanosoma cruzi, ampliamente extendido por el Continente Americano. En Países endémicos se estima que 16-18 millones de personas están infectadas por el parásito. El impacto médico y social de la enfermedad de Chagas es alto, estimandose que se pierden hasta 1.208.5 millones de dólares/año a causa de la enfermedad.

    Un problema en aumento en toda América es la transmisión de la enfermedad a través de la transfusión de sangre, siendo la segunda vía deinfección de Trypanosoma cruzi. Si se tiene en cuenta las emigraciones de Sur a Norte, no solo constituye un problema en Sudamérica sino también en Norteamérica e incluso en Europa. De ahí la necesidad de buscar marcadores que tengan valor diagnóstico.

    El trabajo experimental durante el primer año ha consistido en el aislamiento de las proteínas biotiniladas y el estudio de su localización ultraestructural.

    Para ello después del cultivo "in vitro" de las formas epimastigotas de T.cruzi y la obtención del total de proteínas, se procedió a la purificaicón de estas proteínas utilizando Cromatografía de Afinidad, seguido de la diálisis y la concentración de las mismas por liofilización. A continuación se procedió al estudio de sus propiedades químicas, como el conocimiento de los pesos moleculares o los puntos isoeléctricos utilizando técnicas electroforéticas. Para averiguar la localización ultraestructural de estas proteínas se utilizaron técnicas inmunocitoquímicas por Microscopía Electrónica de Transmisión.

    Durante el segundo año, y con el objetivo de estudiar las propiedades inmunogénicas de estas proteínas y su valor como marcador diagnóstico. Se inmunizaron animales de experimentación y se estudió como reaccionaban estas proteínas frente a distintos sueros chagásicos bien caracterizados así como a frente a otros sueros n