Resumen de Caracterización molecular, efecto sobre el huésped, y transmisión, del micovirus fusarium oxysporum f. Sp. Dianthi virus 1 (fodv1)
1. introducción o motivación de la tesis Los micovirus son virus que se encuentran infectando a hongos. Estas infecciones víricas afectan a la mayoría de los grupos taxonómicos de hongos, incluyendo los hongos patógenos de plantas. La característica más señalada de los micovirus es que carecen de una ruta extracelular de infección, y solo se transmiten intracelularmente mediante anastomosis hifal (transmisión horizontal) o durante la esporogénesis (transmisión vertical) (Nuss, 2005). Usualmente, las infecciones por micovirus son asintomáticas, pero en algunos casos la infección viral se ha asociado a la alteración de determinados caracteres fenotípicos en sus hongos hospedadores. Particularmente interesantes son los micovirus que inducen hipovirulencia en especies fitopatógenas, es decir, que reducen la virulencia del hongo frente a su planta huésped, debido a la posibilidad de ser utilizados como agentes de control biológico de las enfermedades causadas por sus hongos hospedadores. Todos los micovirus asociados a hipovirulencia tienen genomas de RNA de cadena sencilla (ssRNA) o de cadena doble (dsRNA), e incluyen representantes de las familias Totiviridae, Chrysoviridae, Hypoviridae, Narnaviridae y Reoviridae (Ghabrial and Suzuki, 2009; Ghabrial et al., 2015).
2. contenido de la investigación En este trabajo se describe la estructura genómica completa, el efecto sobre el fenotipo del aislado hospedador, y la transmisión, del micovirus Fusarium oxysporum f. sp. dianthi virus 1 (FodV1), un nuevo miembro de la familia Chrysoviridae identificado en el aislado Fod 116 de Fusarium oxysporum f. sp. dianthi.
3. conclusiones FodV1 consta de 4 segmentos de dsRNA de 3.555pb (dsRNA1), 2.809 pb (dsRNA2), 2.794 pb (dsRNA3), y 2.646 pb (dsRNA4). DsRNA1 y dsRNA3 codifican una ARN polimerasa dependiente de ARN y una proteina de la cápsida, respectivamente; dsRNA2 y dsRNA4 codifican proteínas hipotéticas de función desconocida. El análisis filogenético basado en las secuencias aminoacídicas sitúa a FodV1 en la familia Chrysoviridae, dentro del grupo de los que han sido denominados como “chriso-like” micovirus, todos ellos asociados a la inducción de alteraciones fenotípicas en sus hongos hospedadores. El efecto de FodV1 sobre el fenotipo del hongo se ha determinado utilizando dos versiones del aislado portador Fod 116: una con título elevado del virus (la versión original, Fod 116V+), y otra con niveles residuales de infección viral, obtenida mediante selección y análisis de conidias (Fod 116V-). El análisis comparado de ambas versiones ha puesto de manifiesto un efecto significativo del micovirus FodV1 sobre todos los caracteres fenotípicos analizados. La presencia de títulos altos de FodV1 en el aislado Fod 116 altera la morfología y reduce la velocidad de crecimiento radial en medio sólido, disminuye la tasa de conidiación en medio líquido, y reduce la virulencia sobre clavel del aislado fúngico. Todos estos resultados identifican a FodV1 como un nuevo micovirus inductor de hipovirulencia, con potencial para ser utilizado como agente de control biológico. El éxito en la utilización de micovirus para controlar poblaciones de hongos fitopatógenos depende de la capacidad del micovirus para acumularse de manera estable en su hospedador fúngico, así como de su eficiencia para transmitirse entre aislados y dispersarse en las poblaciones fúngicas naturales. FodV1 presenta un elevado nivel de acumulación en su aislado portador original. Nuestros resultados demuestran que este nivel de acumulación permanece estable a lo largo del tiempo, tras sucesivos subcultivos, o después del paso por planta. Por otra parte, también ha quedado demostrado que FodV1 puede transferirse mediante anastomosis hifal entre aislados vegetativamente compatibles. Para evidenciar dicha transferencia se ha utilizado el aislado originalmente infectado (Fod 116V+, donante) y otro aislado compatible libre de virus y marcado con un gen de resistencia a higromicina (Fod 77HgR, receptor). Los resultados evidencian que el virus no solo se transfiere al aislado receptor, sino que además se acumula en éste a niveles inusualmente altos, similares a los detectados en el aislado donante. El análisis comparado de los aislados Fod 77HgR (libre de virus) y Fod 77HgRV+ (infectado con el virus) ha puesto de manifiesto que FodV1 induce en el nuevo aislado hospedador las mismas alteraciones fenotípicas identificadas en el aislado originalmente infectado. La otra vía de diseminación de la infección viral es a través de las esporas asexuales, o transmisión vertical. En esta tesis se ha analizado la eficiencia en la transmisión vertical de los dos aislados infectados con FodV1, Fod 166V+ y Fod 77HgRV+. Los resultados muestran que dicha eficiencia varía dependiendo del aislado considerado. Así, mientras en el aislado Fod 166V+ la eficiencia fue del 24%, con niveles variables de acumulación viral entre esporas, en el aislado Fod 77HgRV+ la eficiencia fue del 100% y todos los cultivos monospóricos exhibieron niveles similares e inusualmente altos de acumulación viral. FodV1 es el primer micovirus asociado a hipovirulencia identificado en la especie F. oxysporum. Sus efectos sobre el huésped y su capacidad de transmisión identifican a FodV1 como un potencial agente de control biológico de la fusariosis vascular del clavel.
4. bibliografía Ghabrial, S. A., and Suzuki, N. 2009. Viruses of plant pathogenic fungi. Annu. Rev. Phytopathol. 47:353-84.
Ghabrial, S. A., Castón, J. R., Jiang, D., Nibert, M. L., and Suzuki, N. 2015. 50-plus years of fungal viruses. J. Virol. 479–480(0):356-368.
Nuss, D. L. 2005. Hypovirulence: mycoviruses at the fungal-plant interface. Nat. Rev. Microbiol. 3(8):632-642.
