Estudio fenotípico, funcional y molecular de inmunodeficiencias con defectos de citotoxicidad y predisposición a infecciones virales y tumores

• Autores: Raquel Ruiz García
• Directores de la Tesis: Luis M. Allende Martínez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2017
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Jesús Ruiz Contreras (presid.), María José Recio Hoyas (secret.), Juana Gil Herrera (voc.), Rebeca Perez de Diego (voc.), Huhg T. Reyburn (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense (pdf)
• Resumen

  • Introducción: La respuesta del sistema inmunológico frente a infecciones víricas y tumores está basada en mecanismos inespecíficos y específicos en la que intervienen numerosos mediadores solubles y celulares como los linfocitos T CD8+ citotóxicos y los linfocitos Natural Killer. Mutaciones monogénicas en alguno de los componentes que participan en este proceso impiden la correcta eliminación de patógenos y tumores en humanos produciendo inmunodeficiencia y malignidad.

    Objetivos: Profundizar en el estudio de inmunodeficiencias con susceptibilidad a infecciones víricas y tumores.

    Resultados: en este trabajo hemos estudiado a 10 pacientes con enfermedades virícas recurrentes por virus de la familia Herpesviridae y con susceptibilidad a malignidad hematológica. El estudio molecular reveló mutaciones monogénicas en cuatro genes relacionados con inmunodeficiencias primarias, 1 paciente con inmunodeficiencia combinada heterocigoto compuesto para mutaciones en DOCK8 de nueva descripción (delEx2-8, ISV17+5 G > A), 4 pacientes con defecto de GATA2 debido a mutaciones en heterocigosis que causan haploinsuficiencia de la proteína, dos de ellas no descritas previamente (p.M236Ifs325X y p.K378X), 2 pacientes hermanos con ALPS y una nueva mutación homocigota en FASLG (C202S) y tres pacientes hermanos con la mutación E525K en PIK3CD que produce ganancia de función de PI3K¿.

    El paciente con mutaciones en DOCK8 conservó parcialmente la expresión de la proteína a diferencia de los casos descritos previamente, lo que provocó alteraciones en el fenotipo clínico e inmunológico menos severas que las presentes en los pacientes con defecto completo de la proteína.

    Los 4 pacientes con haploinsuficiencia de GATA2 presentaron alteraciones importantes en la distribución de las poblaciones linfocitarias. Las células NK estaban muy reducidas en número con características compatibles con NK inmaduras pero con otros rasgos propios de células maduras. Los cambios fenotípicos en el compartimento de linfocitos T sólo fueron observados aquellos pacientes con mayor afectación y severidad clínica, con elevación de marcadores de senescencia y disminución de linfocitos naïve.

    Los 3 hermanos con mutaciones en PIK3CD presentaron las características clínicas e inmunológicas clásicas del síndrome APDS-1 con alteración de la maduración periférica de los linfocitos B y aumento de la senescencia de los linfocitos T. Sin embargo, la caracterización de los linfocitos NK reveló datos desconocidos hasta la fecha. Éstos presentaron una distribución de marcadores de superficie alterada respecto a los controles sanos.

    En contraste los pacientes con defecto de FasL no presentaron alteraciones fenotípicas en los compartimentos T ni NK (datos no mostrados).

    Todos los pacientes mostraron reducción de la capacidad citotóxica. Los pacientes con mutaciones en DOCK8, GATA2 y PIK3CD presentaron defectos en la citotoxicidad gránulo-dependiente en linfocitos NK, mientras que los pacientes con mutaciones en FASLG mostraron un reducción importante en la citotoxicidad mediada por receptores de muerte tras estimulación.

    Conclusiones: Los pacientes con mutaciones parciales en DOCK8 presentan características clínicas e inmunológicas más leves que los pacientes con deficiencia total, los pacientes sintomáticos con defectos de GATA2 presentan alteraciones en el compartimento T derivadas de la situación clínica, en los pacientes con ALPS la susceptibilidad a linfomas T y B puede ser debida a la falta de homeostasis de ambos compartimentos y que la cronicidad de las infecciones víricas y la malignidad presentes en los pacientes con APDS-1 puede ser debida al defecto funcional de los linfocitos NK.

    Éstos hallazgos han ayudado a interpretar los datos clínicos y a orientar la toma decisiones clínicas acordes para cada paciente