Purificación y caracterización de endoglucanasa III de Trichoderma reesei QM9414

• Autores: Ricardo Macarrón Larumbe
• Directores de la Tesis: Carmen Acebal Sarabia (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 1992
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Jose Gregorio Gavilanes Franco (presid.), José Castro Pérez (secret.), Lopez Pilar Estevez (voc.), J. M. Guisán (voc.), Jose Luis Barbero Esteban (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Enzimología
      • Proteínas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen

  • Endoglucanasa iii (eg iii) es una de las enzimas principales del sistema celulasa del hongo trichoderma reesei. En este trabajo se describe un nuevo método de purificación de eg iii que ha permitido disponer de preparados altamente homogéneos de la enzima para abordar su caracterización tanto a nivel estructural como mecanistico. Eg iii tiene una masa molecular de 48 kda, pi 5.1, coeficiente de sedimentacion 3.66 s y razon friccional 1.48; posee 12 cisteinas formando 6 puentes disulfuro. La hidrólisis de b-glicosidos catalizada por eg iii transcurre con retención del carbono anomerico del sustrato, mediante un mecanismo secuencial ordenada uni-bi, con el concurso de un intermediario glicosilenzima. Análogamente a la lisozima, eg iii tiene dos grupos carboxilo esenciales para la catalisis, glu-218 que debe estar protonado y glu-329 que debe estar ionizado en la forma activa de la enzima