Producción y liberación de proteínas heterólogas en mutantes de Saccharomyces cerevisiae afectados en la integridad celular

• Autores: Pablo Alvarez Alvarez
• Directores de la Tesis: César Nombela Cano (dir. tes.), María Molina Martín (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 1995
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Miguel Sánchez Pérez (presid.), Rosa Varona Valle (secret.), Julio Rodriguez Villanueva Garcia (voc.), J. Manuel de la Fuente Carralero (voc.), Margarita Fernández García de Castro (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Microbiología
      • Micología (levaduras)
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen

  • Se ha desarrollado un sistema para la liberación de proteínas heterólogas de S. cerevisiae. Se basa en el uso de mutantes slt2 termosensibles, con un fenotipo complementable por sorbitol, ya que son deficientes en el mantenimiento de la integridad celular. La combinación de la mutación slt2 con mutaciones en los genes de proteasas (pep 4 prb1) aumenta la estabilidad de las proteínas liberadas al medio de cultivo. Células slt2 transformadas con el gen bacteriano cat después hasta un 70% de la proteína heteróloga cat después de cambio a 37 grados C o mediante un choque osmótico de células preincubadas a 37 grados C en presencia de sorbitol. Se propone este sistema basado en los mutantes slt2 para la obtención a gran escala de preparaciones de proteínas sin necesidad de emplear métodos físicos de rotura mecánica, tratamientos enzimáticos o extracciones químicas