Caracterización de la heterocromatina de centeno y disposición cromosómica en la interfase somática en combinaciones hibridas de trigo

• Autores: Esther Garcia Montero
• Directores de la Tesis: Juan Orellana Saavedra (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Politécnica de Madrid ( España ) en 2004
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José María Carrillo Becerril (presid.), César Félix Pérez Ruíz (secret.), José Luis Bella Sombría (voc.), Ataceli Fominaya Yague (voc.), Dori Cabrera Caballero (voc.)
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• Resumen

  • El objetivo final de esta tesis es analizar la disposición del material genético en la interfase de células somáticas de cereales. El material elegido para este análisis, consiste en células somáticas de meristemos radiculares y del tapete de anteras de híbridos interespecíficos trigo-centeno, trigo-tritordeum y trigo-triticale. Los genomios pueden diferenciarse en interfase mediante técnicas de hibridación in situ con fluorescencia (FISH), utilizando como sondas DNA genómico o secuencias especie-específicas.

    Previamente al estudio de la organización de la cromatina en interfase en dichos híbridos, se han caracterizado una serie de secuencias repetidas dispersas de centeno, buscando secuencias específicas que permitiesen identificar la cromatina de centeno en híbridos mediante FISH, evitando la hibridación cruzada e incrementando la exactitud al combinar distintos tipos de sondas.

    Los resultados obtenidos por PCR muestran que existen copias de todas secuencias analizadas en diversas especies de la tribu Triticeae, no siendo exclusivas del género Secale. Dado que podría existir hibridación cruzada, dichas secuencias han sido descartadas para identificar genomios específicos en los híbridos mediante FISH.

    Por otro lado, se han caracterizado tres secuencias repetidas subteloméricas de centeno, buscando un patrón específico para cada pareja de cromosomas homólogos del genomio R. Para cada una de las líneas de centeno analizadas se ha observado un patrón específico de la disposición de dichas secuencias.

    En el estudio de la distribución de un genomio concreto en el núcleo en interfase, se ha comparado la distribución observada para el número de dominios por núcleo del genomio marcado, con la esperada según una distribución binomial en la que se asume que dichos dominios se distribuyen al azar en el núcleo en interfase. Los resultados indicaron que cada genomio no se localiza en una región concreta, s