Diversidad genética en germoplasma de fresa y caracterización de un gen de cistatina

• Autores: Marina Gambardella
• Directores de la Tesis: Isabel Díaz Rodríguez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Politécnica de Madrid ( España ) en 2004
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pilar Carbonero (presid.), Pablo Rodríguez Palenzuela (secret.), Juan Pedro Martín Clemente (voc.), José Manuel López Aranda (voc.), Félix Ortego Alonso (voc.)
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• Resumen

  • Considerando la importancia del cultivo de la fresa a nivel mundial, en el presente trabajo de tesis se usó una estrategia biotecnológica para abordar dos temas de interés en esta especie. En el primer capítulo se presenta una caracterización, mediante marcadores RAPD, de una colección varietal de fresa con el objetivo de disponer de un método rápido y eficiente de identificación de variedades. También mediante marcadores RAPD, se caracterizó una colección de germoplasma silvestre, para analizar la diversidad genética presente en poblaciones de Fragaria chiloensis. En el segundo capítulo, se caracterizó un gen específico que codifica una cistatina, proteína inhibidora de cistein proteasas, la cual puede ser usada como fuente de resistencia contra plagas y enfermedades.

    Los oligonucleótidos cebadores utilizados en el análisis de marcadores RAPD, permitieron la identificación de 39 variedades comerciales. En el caso de los 102 genotipos silvestres analizados, se amplificaron 119 bandas RAPD, de las cuales 102 (85.7%) presentaron polimorfismo, confirmándose su elevado grado de diversidad genética. Los dendrogramas realizados en base a los valores de similitud de Jaccard, mostraron una distancia gradual entre las variedades y los genotipos silvestres. En ambos casos no fué posible identificar grupos filogenéticos distanciados entre sí, aunque se observó correlación entre la distancia entre variedades y sus respectivos orígenes filogenéticos de acuerdo a antecedentes de pedigrí. En el caso de los genotipos silvestres existe correlación entre las distancias genéticas y sus características morfológicas, así como las áreas de distribución geográfica.

    A partir de un EST obtenido de fruto de fresa de la colección de Wageningen, Holanda, se caracterizó un gen (Cif-1) que codifica una cistatina denominada Fa-CPI-1. El cDNa correspondiente se clonó y usó para transformar E. coli y purificar la cistatina men