Resumen de Polarización de fluorescencia y rotación browniana: aplicación a macromoléculas biológicas
María del Pilar Lillo Villalobos
En este trabajo nos hemos propuesto estudiar la difusión rotacional browniana de proteínas solubles mediante las técnicas de despolarización de fluorescencia. Para ello hemos seleccionado y puesto a punto un método instrumental: método de contaje de fotones únicos correlacionados temporalmente. Se ha hecho además un estudio de la posible extensión de estas técnicas al estudio de la zona de tiempos de microsegundos y como aplicación se estudian las características estructurales del fibrinogeno humano en condiciones fisiológicas y en concreto la posible flexibilidad segmental de la proteína. Las técnicas de despolarización de fluorescencia con resolución temporal nos han permitido confirmar la forma alargada de la molécula y demuestran que es improbable la existencia de flexibilidad segmental en la zona 10-1000 ns. Además proporcionan información suficiente para construir un modelo de la proteína esencialmente rígido (en la zona de tiempos citada).
