Expresión de marcadores moleculares en espermatogonias

• Autores: Mariana Ianello Giassetti
• Directores de la Tesis: Pedro Muniesa Lorda (dir. tes.), Johan Albert Schoorlemmer (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2015
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Mayra Elena Ortiz d´Ávila Assumpção (presid.), Marcelo Demarchi Goissis (secret.), Mario Binelli (voc.)
• Materias:
  • Ciencias agrarias
    • Producción animal
      • Reproducción
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • En mamíferos la espermatogénesis es mantenida por la auto-renovación y diferenciación de las células madre espermatogoniales (SSC). A pesar de la gran importancia de las SSC para la fertilidad masculina, en Bos taurus poco se sabe acerca de su identificación y biología celular. En ratones se han descrito más de 30 marcadores para células germinativas indeferenciadas pero todavía no se ha descrito un marcador específico para SSC. Casi todos marcadores de SSC son también expresados por gonocitos, espermatogonias más diferenciadas o hasta células somáticas. Yin Yang 2 (YY2) es un factor de transcripción que se expresa en células con la morfología y la localización propia de gonocitos y SSC, siendo un candidato a marcador para SSC. La identificación de nuevos marcadores para SSC y de factores que afectan su expresión, como la edad, son fundamentales para el desarrollo de biotécnicas en que se puedan utilizar las SSCs como herramientas biológicas en transgenesis animal y tratamiento de infertilidad. Este trabajo tiene dos hipótesis principales: 1) la edad del bovino donante afecta la expresión de marcadores moleculares específicos de las SSC así como su potencial de célula madre y 2) que YY2 tiene funciones importantes en SSC, y que las secuencias genómicas a las que se asocia YY2 representan loci de importancia para SSC. Los objetivos específicos fueron organizados en cuatro artículos científicos: identificar el mejor plaqueamento diferencial para enriquecer SSC bovinas (articulo 1), comprobar que la expresión de marcadores moleculares de las SSC bovinas difiere entre animales prepúberes y adultos (articulo 2 y 3), identificar nuevos marcadores específicos para SSC de Bos taurus (articulo 2 y 3), comprobar que la edad afecta el potencial de célula madre de las SSC bovinas (articulo 3), describir YY2 como un marcador específico para SSC en ratón y testar si las secuencias de DNA a las que se asocia YY2 (identificados previamente) tienen capacidad de regulación génica en SSC. Como conclusiones, definimos el mejor plaqueamento diferencial para el enriquecimiento de SSC bovinas, aportamos pruebas que la edad afecta la expresión de marcadores ya consagrados, afecta un número pequeño la expresión de un número restringido de genes dentro del transcriptoma de SSC bovino, y comprobamos que la edad también afecta su potencial de célula madre (ensayo de repoblación). Aportamos a la identificación de YY2 como marcador de SSC en cultivo, de ratones adultos, y demostramos la capacidad de regulación genética en SSC de ratón de las secuencias a las que se asocia YY2.