Proteómica de cuerpos lipídicos en la senescencia y la infección por Pseudomonas syringae en Arabidopsis thaliana

• Autores: Rubén Fernández Santos
• Directores de la Tesis: Carmen Castresana Fernández (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2018
• Idioma: español
• Número de páginas: 128
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología vegetal (botánica)
      • Fisiología vegetal
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • En este trabajo hemos observado la formación de cuerpos lipídicos en hojas de Arabidopsis durante la respuesta de la planta a la infección con la bacteria hemibiotrofa Pseudomonas syringae DC3000 avrRpm1 y durante la senescencia de la planta. Para analizar su composición hemos puesto a punto un método de purificación que permite obtener fracciones enriquecidas en LDs mediante centrifugación en gradientes de densidad. Las fracciones de LDs obtenidas han sido examinadas mediante espectrometría de masas y los proteomas correspondientes han sido determinados.

    Estos análisis han puesto de manifiesto la presencia de 70 proteínas en los proteomas de LDs obtenidos de tejidos senescentes y de 72 y 81 proteínas en los proteomas de LDs procedentes de hojas infectadas con la bacteria Pst DC3000 avrRpm1 durante 24 y 72 horas, respectivamente. El análisis de los proteomas caracterizados mostró un enriquecimiento en proteínas que participan en la respuesta de la planta a estímulos bióticos y abióticos, a estrés y en el transporte entre orgánulos o estructuras celulares, lo que sugiere la participación de los LDs en este tipo de procesos. La validez de los datos proteómicos se examinó mediante expresión transitoria de proteínas de fusión con GFP en hojas de Nicotiana benthamiana durante la defensa activada por la infección de la bacteria Pseudomonas syringae pv. syringae. Estos ensayos permitieron confirmar la localización de las enzimas GPAT4, GPAT8, ALDH3F1, α-DOX1 y CLO3 en LDs, mientras que la proteína PAD3:GFP se localiza en la membrana y en el ER en forma de vesículas.

    La presencia de proteínas de tipo GPAT sugiere la participación de los LDs en procesos relacionados con la modificación y/o síntesis de la cutina. Por otro lado, la presencia de ALDH3F1, α-DOX1 y CLO3 apoya la participación de los LDs en la síntesis de oxilipinas.

    Las proteínas identificadas ponen de manifiesto la presencia en los LDs de nuevos componentes proteicos, no identificados hasta el momento, y permiten proponer nuevas funciones y procesos en los que los LDs formados en los tejidos vegetativos de la planta podrían participar