Resumen de Bioquímica de las reacciones de transferencia de cadenas de dna catalizadas por la proteína trwc
En este trabajo se analizan a nivel bioquímico las reacciones de transferencia de cadenas de DNA que cataliza la proteína TrwC y más concretmaente, un dominio de la proteína bien definido, donde reside la actividad relaxasa.
TrwC es el enzima que se une al origen de transferencia y cataliza el corte sitioespecífico del DNA que inicia y termina la transferencia del DNA en el proceso conjugativo.
Se ha comprobado que la región aminoterminal de TrwC puede considerarse como un dominio, estructural y funcionalmente independiente del resto de la proteína, localizado entre el extremo aminoterminal de la proteína y el residuo de arginina R300.
El dominio aminterminal es capaz de llevar a cabo las reacciones que in vitro, caracterizan la actividad relaxa de un enzima: unión de ssDNA, corte y transferencia de ssDNA y relajación de dsDNA. Estas reacciones son específicas de secuencia, siendo el único sustrato válido el sitio nic de R388 y no el de otros sistemas conjugativos.
La estructura nativa del dominio aminoterminal de TrwC se recupera espontáneamente, en las condiciones adecuadas, tras denaturalizar la proteína con un tratamiento térmico. Al igual que la estructura, la actividad relaxa, medida a través de las reacciones mencionadas en elpunto anterior, también se recupera.
El segmento comprendido entre los residuos 275-293 es un probable candidato para ser el responsable del reconocimiento del dsDNA.
