Nuevas metodologías analíticas basadas en lc-itms para la determinación de diuréticos y metabolitos en fluidos biológicos
- Autores: Urtzi Akesolo Muguruza
- Directores de la Tesis: Ramón José Barrio Díez-Caballero (dir. tes.), Rosa Maria Alonso Rojas (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea ( España ) en 2009
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Joan Sallés Alvira (secret.), Rosa Ventura Alemany (voc.), Luis María Polo Díez (voc.), María Aranzazu Goicolea Altuna (voc.), Antonio Pla Martínez (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Los diuréticos abarcan una variada gama de compuestos ampliamente empleados en la lucha contra la hipertensión y en prácticas de dopaje en deporte. Entre ellos, los diuréticos del asa o alta eficacia (representados por bumetanida, furosemida, piretanida y torasemida) y los diuréticos tiazídicos (con su máximo exponente hidroclorotiazida) son ampliamente prescritos y empleados en terapia simple o terapia combinada.
El presente trabajo desarrolla un método de determinación de diuréticos en matrices biológicas (sangre y orina) mediante cromatografía líquida con detección por espectrometría de masas con analizador de trampa de iones (LC-ITMS).
Para ello, se llevó a cabo un estudio exhaustivo de los parámetros de la separación cromatográfica, mientras que los parámetros operacionales propios del ITMS y los correspondientes a los compuestos a estudio fueron estudiados mediante infusión directa. De este modo, se desarrolló un método de determinación MS/MS con que cuantificar los diuréticos a estudio en los bajos niveles de concentración requeridos.
A continuación se aplicó el método desarrollado a las matrices biológicas sangre y orina. Se estudió la posible existencia de efecto matriz y los tratamientos previos de muestra más adecuados. Las sistemáticas desarrolladas (dilución y filtrado de orina y precipitación de proteínas, centrifugado y filtrado de plasma) resultaron extremadamente sencillas y fáciles aplicar. La evaluación analítica del método fue satisfactoria en ambas matrices La metodología desarrollada se aplicó con éxito a la determinación de los compuestos a estudio en muestras reales de voluntarios sanos que ingirieron dosis terapéuticas.
Los bajos niveles de cuantificación alcanzados permitieron la determinación de todos los compuestos a estudio y varios metabolitos de torasemida (único compuestos que se metabolizaba extensivamente) y dejan la puerta abierta a futuros estudios clínicos de farmacocinética y farmacodinámica.
