Resumen de Estudio de la influencia de los fármacos antiinflamatorios en el funcionamiento del sistema oxidativo de los polimorfonucleares humanos. Cuantificación
Los leucocitos polimorfonucleares(PMN) poseen mecanismos de defensa, dependientes e independientes del oxígeno, frente a la mayoria de agentes patógenos. En condiciones fisiológicas, la activación de estas células durante la fagocitosis o exposición a agentes extraños desencadena la generación de radicales libres derivados del oxígeno en un proceso denominado explosión respiratoria. Cualquier alteración que provoquen los fármacos en el metabolismo oxidativo de los PMN, sobre todo en los pacientes inmunodeprimidos, va a comprometer el éxito de la terapia establecida.
El objetivo de esta investigación es estudiar el efecto que los fármacos antiinflamatorios, ampliamente utilizados en clínica, ejercen sobre la generación de anión superóxido y peróxido de hidrógeno de los PMN. Para ello se necesita estandarizar el método de cuantificación de estos oxidantes dado que no existe consenso internacional acerca de los métodos a utilizar,y cuantificar los valores normales de su liberación in vitro, tanto en estado basal como activado, en la población sana.
Para la cuantificación de anión superóxido se utiliza al método de reducción del citocromo c y para medir la generación de peróxido de hidrógeno el método de oxidación del rojo fenol. Ambos métodos espectrofotométricos utilizan pequeño volumen de células y de reactivos lo que permite analizar gran número de muestras en paralelo y, también permiten el seguimiento de la cinética de reacción.
Para determinar la influencia de cada antiinflamatorio y de su combinación con otros fármacos (antifúngicos, antivírico y antibioticos) se establecen dos condiciones experimentales :1)la adiccion de los fármacos a la mezcla de reacción, sin pretratamiento de los PMN y, 2)el pretratamiento de los neutrófilos con los fármacos durante 30 minutos a 37º C. Esto nos permite distinguir si el efecto observado se debe a la acción directa de los fármacos sobre la
