Resumen de Alteraciones genéticas de los Receptores Fc gamma y consecuencias funcionales de la ausencia de CD16

Adriana Patricia Pérez Portilla

• español

  Los receptores Fc gamma desempeñan un papel importante en las reacciones inmunitarias al unirse a la región Fc de la IgG y activar mecanismos efectores como la fagocitosis y citotoxicidad. Uno de estos receptores que se ha estudiado extensamente sobre todo por ser el único receptor Fc de las células NK es FcγRIIIA (CD16A). En esta tesis, hemos tenido la oportunidad de estudiar las consecuencias de la ausencia de expresión de CD16A en las células NK. En una familia ecuatoriana, tres de sus miembros heredaron del padre una deleción de una región del locus FCGR a la que nosotros denominamos CNR5, que dio lugar a la presencia de un gen recombinante FCGR3B/A, y de la madre una deleción de la región CNR2, que significa la ausencia del gen FCGR3A en ese alelo. Dichos individuos no expresan CD16A en sus células NK ni en monocitos, y el ARNm del gen recombinante se encuentra solamente en las células polimorfonucleares, sin evidencia de expresión de proteína en estas células. En cuanto a la funcionalidad como era de esperarse la ausencia de CD16A afecta la capacidad de que las células NK puedan realizar su función de ADCC, más no tiene consecuencias en la citotoxicidad natural, cuyos valores fueron comparables a los de individuos sanos, tanto in vitro como in vivo. Los niveles elevados de ADNemia de EBV en el paciente inmunodeficiente que le ha causado complicaciones en su salud, sugieren que la ADCC es importante para el control de la replicación de este virus. También se ha observado que CD16A es importante en la expansión de una población de células NK llamadas adaptativas.

  El estudio de esta familia nos llevó a preguntarnos por la variabilidad genética en el locus FCGR que poseen los individuos de la población ecuatoriana. Realizamos una búsqueda de nuevos SNPs en el gen FCGR3A encontrando dos no descritos en la literatura. En una cohorte de 70 individuos procedimos mediante ensayos de MLPA a caracterizar CNVs y SNPs puntuales. Los resultados obtenidos, como era de esperarse, eran similares a las de otras poblaciones latinoamericanas. Sin embargo, no encontramos ningún individuo con el recombinante FCGR3B/A, así que procedimos a precisar nuestro estudio en la comuna de Llano Grande, lugar de origen de esta familia. En la población llanograndense se encontró que un 9.52% poseía el gen recombinante, y las proporciones de las variables genéticas que encontramos eran probablemente consecuencia de la deriva genética al tener este pueblo una propensión a la endogamia debido a su organización social.

• English

  Fc gamma receptors play an important role in immune responses by binding to the Fc region of IgG and activating mechanisms of cellular immunity including phagocytosis and cytotoxicity. One receptor that has been extensively studied especially since it is the only Fc receptor expressed by NK cells is FcγRIIIA (CD16A). In this thesis, the consequences of the absence of expression of CD16A have been studied. In an Ecuadorian family, three of its members inherited from the father a deletion of a region of the FCGR locus, which we call CNR5, that gives rise to a recombinant gene FCGR3B/A, and from the mother a deletion of the CNR2 region, which means the absence of the FCGR3A gene in this allele. These individuals do not express CD16A in their NK cells or in monocytes and CD16B/A mRNA is found only in polymorphonuclear cells, with no evidence of protein expression in these cells. In terms of function, as expected the absence of CD16A affects the ability of NK cells to perform their function of ADCC, but has no consequences for natural cytotoxicity, as compared to healthy individuals, both in vitro and in vivo. Elevated levels of EBV DNAemia in peripheral blood of the immunodeficient patient that have caused disease suggest that ADCC is important for immune control of replication of this virus. It has also been observed that CD16A is important in the expansion of “adaptive” NK cells. The study of this family led to analysis of genetic variability in the FCGR locus in ecuadorian populations. A search for new SNPs in FCGR3A gene identified two variants not previously described in the literature. Further, in a cohort of 70 individuals from Ecuador specific CNVs and SNPs were characterised by MLPA. The results obtained were similar to those of other Latin-American populations. However, we did not find any other individual with the recombinant gene FCGR3B/A, therefore the study was extended to focus on a specific population of Ecuador, the Llano Grande indigenous commune, the origin of this family. In the Llanogrande population 9.52% of individuals possessed the recombinant gene, and the proportions of genetic variables observed were likely a consequence of genetic drift because this commune has a propensity to inbreeding due to its social organization.