Resumen de Adenilato ciclasa vi y filamina b, dos genes regulados por tgf-beta1 durante la angiogénesis in vitro
La angiogénesis o formación de nuevos vasos a partir de la vasculatura pre-existente es estimulada pro factores como VEGF, FGF, TGF-beta1.. En el desarrollo de esta tesis doctoral se ha analizado el efecto que ejercen determinados genes sobre la angiogénesis mediada por TGF-beta1. Estos genes fueron identificados a partir de un screening realizado sobre células endoteliales en tres dimensiones en geles de colágeno estimuladas o no con TGF-beta1. Por una parte se identificó el gen de Adenilato Ciclasa VI, que era reprimido por efecto de TGF-beta1 y por otro Filamina B, gen que era inducido.
En el primer capítulo, se describe el efecto que AMPc ejerce sobre la angiogénesis mediada por TGF-beta1. AMPc ejercía un efecto negativo sobre la angiogéneiss, bloqueándola, lo que se traducía en un descenso de expresión de marcadores típicos angiogénicos, como Ets-1 así como en la transcripción de genes tempranos de respuesta a TGF-beta1 como PAI-1. Por otra parte, AMPc no afectaba a la viabilidad de las células endoteliales, a la fosforilación y traslocación de las Smadas al núcleo o en su unión al DNA.
En el segundo capitulo de esta tesis doctoral, se analiza el posible papel de la Filamina B en la angiogénesis mediada tanto por TGF-beta1 como por VEGF. Este gen fue encontrado en el screenig como inducido por TGF-beta1. Una vez comprobado este hecho, se realizó una caracterización de la expresión de esta proteína en células y tejidos. Se constató que Filamina B se expresaba fundamentalmente en células endoteliales de vasos sanguíneos. Filamina B inmunoprecipitaba tras la estimulación con VEGF con el receptor 2 de VEGF, con Rac1 y con las integrinas alfavbeta3 y alfavbeta5. El descenso de expresión de Filamina B en células HUVE mediante siRNAs, conllevaba fallos en migración, reorganización pseudotubular así como fallos en la reorganización del citoesqueleto de actina. Este posible efecto sobre la angiogénesis podría venir
