Caracterización funcional de nap1 en el ciclo celular de schizosaccharomyces pombe

• Autores: M. Isabel Grande Robles
• Directores de la Tesis: Rosa Aligué Alemany (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2005
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Neus Agell Jané (presid.), Josep Maria Estanoyl Ullate (secret.), Joaquim Roca Bosch (voc.), Montserrat Jaumot Pijoan (voc.), José Ayté del Olmo (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
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• Resumen

  • El presente trabajo se ha basado en el estudio de la proteína Nap1 durante el ciclo celular de la levadura de fisión S.pombe. Se ha descrito en diversos organismos, tales como S.cervisiae, D.melanogaste y X.laevis, que Nap1 es una proteína chaperona de histonas implicada en la remodelación de la cromatina. Nuestro estudio ha demostrado que la delección del gen nap1 provoca un retraso durante la entrada en mitosis debido a la activación específica del checkpoint de replicación y no de daño al DNA. Se ha detectado que la activación de Cds1, efector del checkpoint de replicación, promueve la inactivación del complejo promotor de la mitosis Cdc2/CicB, provocando así un bloque durante la transición G2/M del ciclo celular. Ensayos de viabilidad han demostrado que la delección de cds1 en células deficientes en Nap1 provoca un notable descenso en la viabilidad celular. Este resultado indica que la activación de Cds1 es necesaria en las células deficientes en Nap1 para reparar los defectos replicativos derivados de la delección de nap1, evitando así la acumulación de errores que den lugar a una bajada en la viabilidad celular. Nuestro estudio también ha demostrado que Nap1 se une a la historia H2A in vivo y que participa en la remodelación de la cromatina in vitro estimulando el proceso de deslizamiento nucleosómico.

    El estudio de la localización subcelular de Nap1 es una proteína nucleocitoplasmática que se encuentra en el núcleo de forma transitoria y se exporta fuera de él de forma regulada. Así, mientras que la localización mayoritaria de Nap1 es citoplasmática, la delección de la secuencia NES promueve la retención de Nap1 en el interior del núcleo, lo que indica que la secuencia identificada es funcional y que la localización de Nap1 no es estática. Se ha demostrado también que la fosforilación de Nap1 por el complejo Cdc2/cicB promueve la calidad de Nap1 al citoplasma, ya que la inactivación de dicho