Mechanisms of glucocorticoid action on the jnk signalling pathway

• Autores: Alejandra Bruna
• Directores de la Tesis: Carme Caelles Franc (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pedro Marrero González (secret.), Alberto Muñoz Terol (voc.), Paloma Pérez (voc.), John M. Kyriakis (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
    • Genética
      • Ingeniería genética
    • Biología molecular
  • Ciencias médicas
    • Ciencias clínicas
      • Genética clínica
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• Resumen

  • Los resultados realizados en este trabajo sugieren la implicación de las proteínas inhibidoras del ciclo celular (921 waf1 y p27 kip1) en el mecanismo de inhibición de la JNK por desametasona a tiempos largos de tratamiento con la hormona. En experimentos de ensayo de actividad JNK in vitro se ha comprobado que tanto la proteína recombinante GST-p21 waf1 como GST-p27 kip1, inhiben, de manera dosis dependiente, la activación de la JNK. También se demuestra que la concentración de dex necesaria para transreprimir y para inhibir a la JNK es la misma y de un orden de magnitud inferior a la necesidad para activar la expresión de sus genes diana. Para estudiar en mayor profundidad el mecanismo molecular por el que un tratamiento corto con GCs inhibe la activación de la JNK, analizan el efecto de dex en la integridad de los complejos MKK7 y JNK.

    De acuerdo con resultados previos, la JNK se encuentra en complejos jutnoa la MKK7 y un tratamiento corto con dex claramente reduce la cantidad de MKK7 unida a JNK. En una aproximación experimental similar, la disociación entre JNK y MKK7 inducida por dex se correlaciona con la inhibición de la JNK mediada por sobrexpresión de MKK7. Posteriormente, utilizando un mutante del GR (GR NL1-) que es incapaz de acumularse en el núcleo en respuesta a hormona, demuestran que la inhibición de la JNK por GCs tiene lugar en el comportamiento citoplasmático y sugieren que la disociación entre MKK7 y JNK inducida por dex es suficiente para la inhibición de la ruta de la JNK, mientras que la acumulación nuclear de JNK puede ser dispensable para esta determinada acción. Asimismo, demuestran que existe una interacción entre la JNK y GR inducida por hormona. Haciendo uso de otros mutantes como el GR dim y una construcción que contiene 25 amino ácidos de la región visagra y todo el dominio de unión a ligando (GR-LBD), y de análogos de glucocorticoides (ZK07, ZK57, RU486), demuestran que la capacid