Resumen de Biosíntesis de asparragina y glutamina en hojas de tomate infectadas por pseudomonas syringae
Durante la interacción entre un microorganismo fitopatógeno y su planta hospedadora se producen una gran cantidad de cambios fisiológicos, metabólicos y moleculares en la planta huésped. Nos hemos centrado en estudiar los cambios que se producen en el metabolismo del nitrógeno durante el proceso infectivo, ya que este es un punto central del metabolismo de la planta y es un aspecto poco estudiado durante la interacción.
Como modelo de trabajo hemos utilizado la interacción de tipo compatible entre tomate y Pseudomonas syringae pv.tomato.
Evidencias derivadas de trabajos previos desarrollados en nuestro laboratorio surgieren que durante el proceso de patogénesis se produce un importante proceso de movilización de nitrógeno en los tejidos infectados, por lo que nos centramos en estudiar los cambios que se producían en las principales enzimas responsables de la reasimilación del nitrógeno en plantas: glutamina sintetasa (GS) y asparragina sintetasa (AS). En los tejidos infectados se observó la expresión coordinada de una GS de tipo citosólica (GS1) y una AS junto con la acumulación de sus respectivos polipéptidos.
La caracterización realizada para AS en el genoma de tomate junto con los datos existentes en las bases de datos indican que en tomate existen al menos dos genes diferentes para AS, con patrones de expresión y papeles fisiológicos diferenciados.
La localización de la expresión de estas enzimas y de sus polipéptidos se realizó mediante técnicas de hibridación in situ e inmunolocalización, encontrándose asociada la expresión de GS1 a las células de mesófilo fotosintético y de AS asociada a los vasos de floema de los haces vasculares en los tejidos infectados. Un patrón similar se observó para la acumulación de sus respectivos polipéptidos.
Para determinar el papel fisiológico de estas enzimas se realizaron medidas de aminoácidos libres tanto en tejido como en exudados floemáticos, encontrándose que
