Resumen de Caracterización molecular y expresión de los genes de cebada iat1, iat2 e iat3 que codifican las subunidades del inhibidor tetramerico de alfa-amilasa
Se han caracterizado clones cdna de endospermo de cebada correspondientes a las proteínas btai-cma, btai-cmb y btai-cmd, componentes del inhibidor tetramerico de alfa-amilasas heterologas. La secuencia deducida para la proteína madura esta precedida siempre de un peptido señal de 25-26 aminoácidos. Se han obtenido por pcr las zonas promotoras de los genes correspondientes iat1, iat2 e iat3 habiendose localizado en ellos ademas de motivos tata y cacaca, posibles zonas de union por activadores tipo gcn4 y myb. Los genes no tienen intrones. Se han cuantificado los mrnas en distintos tejidos y en mutantes altos en lisina derivados del cv. Sultan, habiendose detectado la expresión coordinada de estos en el endospermo en desarrollo (maximo 18 dias despues de polinizacion). Tambien se detectan bajos niveles en coleoptilos y raices para iat1, no viendose afectados estos por tratamientos con ácidos salicílico y abscisico, mientras que 50 m jasmonico inhibe esta expresión. En el mutante 1242, los niveles estacionarios de mrna de iat1, iat2 e iat3 son 20% de los encontrados en el cv. Salvaje sultan del que deriva, como no se han detectado ni alteraciones en el n de copias, ni reestructuraciones mayores en los genes estructurales ni en sus promotores, un factor transcripcional alterado o silenciado durante el proceso de multagenesis pudiera ser la causa de esta menor expresión en el mutante.
