Resumen de Aislamiento y caracterizacion genetica de los genes implicados en la biosintesis de antigeno 04 de serratia marcescens n28b
La caracterización genética llevada a cabo se ha basado en: (i) selección de clones recombinantes, a partir deuna genoteca de ADN cromosómico de Serratia marcescens N28b, resistentes a la bacteriocina 28b y al suero, (ii) complementacion de la mutación rfb-50 de E.coli DH5a,(iii) analisis de la producción de antígeno O en geles de poliacrilamida y SDS, (iv) determinación del tipo de antígeno O producido por inmunoelectrotransferencia usando anticuerpos especificos, (y) determinación de la secuencia de nucleotidos, y (vi) construcción de mutantes definidos en el fondo genético de la propia S.marcescens N28b.
Los resultados obtenidos prueban que los genes implicadas en la biosíntesis del antigeno O4 de S.marcescens N28b se hallan agrupados (cluster) en su cromosoma. En esta agrupación se encuentran: dos genes implicados en las ultimas etapas de la biosintesis de la dTDP-Lramnosa (rmlC y rmlD), una ramnosil transferasa (wbbL), una glucosil transferasa (wbbA) y dos genes (wzm, wzt) que constituyen un transportador de tipo ABC-2. Esta organización genética esta de acuerdo con la estructura de la unidad de repetición del antigeno O4[L-Ramnosa a1-4-d-Glucosa]. Los resultados obtenidos permiten proponer un nuevo modelo de transporte de antígenos O heteropolisacaridicos dependientes de sistemas de transporte ABC-2.
