Estudio de la distribucion y efectos biologicos de los oligonucleotidos antisentido en los linfocitos b humanos

• Autores: Gema Tarrason Encuentra
• Directores de la Tesis: Jaume Piulats (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 1997
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José García-Valero (secret.), Salvador Francisco Aliño Pellicer (voc.), Albert Badia Sancho (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Ácidos nucleicos
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
      • Cultivo celular
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • LOS OLIGONUCLEOTIDOS ANTISENTIDO HAN ABIERTO UNA GRAN EXPECTATIVA DE CARA A SUS POSIBILIDADES DE UTILIZACION COMO INHIBIDORES ESPECIFICOS DE LA SINTESIS PROTEICA. EN ESTE TRABAJO SE PLANTEO SU UTILIZACION PARA DEFINIR LA FUNCION DE GENES IMPLICADOS EN EL CAMBIO DE ISOTIPO DE LAS INMUNOGLOBULINAS (LGS). DADA LA INESTABILIDAD DEL ADN NATURAL, SE ANALIZARON LAS MODIFICACIONES QUIMICAS DE LOS OLIGONUCLEOTIDOS CON MEJORES POSIBILIDADES DE CARA A SU UTILIZACION EN CULTIVOS PRIMARIOS DE LINFOCITOS B HUMANOS SOBRE LOS QUE SE INDUJO EL CAMBIO DE ISOTIPO DE IGM A IGG1.

    LA INCORPORACION DE LOS OLIGONUCLEOTIDOS EN LOS LINFOCITOS B SE MOSTRO UN PROCESO ACTIVO COMPATIBLE CON UNA ENDOCITOSIS DE FASE FLUIDA O ADSORTIVA Y QUE LLEVABA ASOCIADO UN PROCESO DE EXOCITOSIS. LA CINETICA DE INCORPORACION DEPENDIA DE LA LONGITUD DEL OLIGONUCLEOTIDO Y DEL TAMAÑO, EL ESTADO DE ACTIVACION Y LA CONCENTRACION CELULAR. UNA VEZ INCORPORADOS, LOS OLIGONUCLEOTIDOS SE ACUMULAN MAYORITARIAMENTE EN LOS LISOSOMAS, SEGUN MOSTRO EL ANALISIS INMUNOCITOQUIMICO Y ULTRAESTRUCTURAL MEDIANTE LA UTILIZACION DE OLIGONUCLEOTIDOS CONJUGADOS CON DIGOXIGENINA. ESTOS ESTUDIOS REVELARON LA PRESENCIA DE PEQUEÑAS CANTIDADES DE OLIGONUCLEOTIDO EN CITOPLASMA Y NUCLEO QUE PODIAN SER RESPONSABLES DE UN EFECTO ANTISENTIDO. LOS OLIGONUCLEOTIDOS PUEDEN TENER EFECTOS INESPECIFICOS, ALGUNOS ASOCIADOS AL TIPO DE MODIFICACION QUIMICA Y OTROS ASOCIADOS A SECUENCIA. LOS OLIGONUCLEOTIDOS FOSFOROTIOATO INDUCEN, A CONCENTRACIONES BAJAS, LA SINTESIS DEL FACTOR DE TRANSCRIPCION SP1. LOS OLIGONUCLEOTIDOS CON MOTIVOS CPGPG INDUCEN UNA PROLIFERACION DE LOS LINFOCITOS B HUMANOS QUE PUEDE INTERPRETARSE COMO UN MECANISMO DE DEFENSA INMUNOLOGICO.

    MEDIANTE LA UTILIZACION DE OLIGONUCLEOTIDOS ANTISENTIDO HEMOS PODIDO DEFINIR LA IMPORTANCIA DE LA REGION 3' MAS ACCESIBLE DE LA REGION S EN EL PROCESO DEL CAMBIO DE ISOTIPO INDUCIDO POR EL SAC Y LA IL2 SOBRE LOS LINFOCITOS B. NUESTROS RESULTADOS APUNTAN TAMBIEN