Resumen de Caracterizacion de nuevos genes de alfa-tubulina en el maiz
Hasta el momento, en el maíz se han descrito seis cDNAs de genes de alfa-tubulina. Solo tres clones genómicos han sido caracterizados correspondientes a los genes tua1, tua2 y tua3. Usando como sonda la parte conservada del gen tua1, se realizó un cribado sobre un banco de cDNA de maiz. De este banco se obtuvieron además de los tres genes ya conocidos otros dos que correspondían al tua4 y tua6.
Para aislar los clones genómicos, se usaron las secuencias de la parte 3' no codificante de los dos genes como sondas para cribar un banco genómico. Después de varias purificaciones, se pudo aislar un clon que correspondía al gen tua6 pero que solo contenía la región 3' del gen. El mapa de restricción y su secuencia mostraron los dos últimos exones del gen, dos intrones (uno no completo) y la secuencia 3' no codificante del mismo. Para obtener el resto de la secuencia de este gen, se usó una sonda que representaba la parte 5' de la secuencia incompleta del gen tua6 para cribar un nuevo banco genómico. De este cribado se aislaron tres clones que contenían insertos solapantes del gen tua5 entero (3674 pb) pero ninguno del tua6. El mapa de restricción del gen tua5 mostraba 5 exones y 4 intrones. La secuencia del gen tua5 codifica para una alfa-tubulina que contiene 450 aminoácidos con alta similaridad al resto de las alfa-tubulinas conocidas.
En esto trabajo, mediante análisis por "Southern" con una sonda no especifica del gen tua5 se han podido observar seis fragmentos que podrían corresponder a los seis genes expresados de la alfa-tubulina presentes en el genoma del maíz. Usando sondas específicas para los genes tua5 y tua6, para cuantificar los niveles de transcritos de estos genes en diferentes tejidos, se observó que ambos genes son preferencialmente expresados en polen.
Los resultados de comparar de las secuencias aminoacídicas de los genes de alfa-tubulina descritos hasta ahora en plantas y algas sugieren q
