Resumen de Caracterizacion molecular del promotor del gen ald de escherichia coli
EL GEN ALD DE ESCHERICHIA COLI CODIFICA LA ENZIMA ALDEHIDO-DESHIDROGENASA (ALDH) QUE ESTA INVOLUCRADA EN EL METABOLISMO DE LOS AZUCARES L-FUCOSA, L-RAMNOSA Y D-ARABINOSA EN LA CEPA SALVAJE DE E. COLI, ASI COMO EN LA UTILIZACION DE PROPANODIOL Y ETILENGLICOL EN MUTANTES CAPACES DE CRECER EN ESTOS GLICOLES. LA EXPRESION DEL GEN ALD PRESENTA UN ESPECIAL INTERES DEBIDO A LA MULTIPLICIDAD DE LOS CONTROLES A LOS QUE SE SOMETE, QUE SE DAN FUNDAMENTALMENTE A NIVEL TRANSCRIPCIONAL Y SON: UN CONTROL POSITIVO EN UNA ZONA OPERADORA COMPRENDIDA ENTRE LOS NUCLEOTIDOS (NT) -5 Y -58 MEDIADA POR PRESENCIA DE MOLECULAS INDUCTORAS CAPACES DE RECONOCER Y ACTIVAR UNA O MAS PROTEINAS REGULADORAS ESPECIFICAS (DOS PATRONES DE INDUCCION DISTINTOS EN FUNCION DE SI EL INDUCTOR ES DEL TIPO LACTALDEHIDO O DEL TIPO DEL 2-OXOGLUTARATO); UN CONTROL POR REPRESION CATABOLICA A TRAVES DE DOS SISTEMAS, DEPENDIENTE E INDEPENDIENTE DE AMPC, A CARGO DE LA PROTEINA CRP (ZONA OPERADORA DE -40 A -83; KD=5,5 10-7M) Y, PROBABLEMENTE, DE UN FACTOR TIPO CMF (NT -119 AL -148) Y, FINALMENTE, UN CONTROL RESPIRATORIO QUE ACTIVA LA EXPRESION EN CONDICIONES AEROBICAS Y LA REPRIME EN CONDICIONES ANAEROBICAS, A TRAVES DE UN MECANISMO MEDIADO POR EL SISTEMA ARC (QUE OPERA EN LOS PRIMEROS 108 NT POR ENCIMA DEL INICIO DE TRANSCRIPCION). ASIMISMO, EL FACTOR IHF PRESENTA UN EFECTO INDIRECTO INVOLUCRADO EN EL MANTENIMIENTO DE ESTA COMPLEJA ESTRUCTURA NUCLEOPROTEICA.
CURIOSAMENTE, Y A TRAVES DE MUTANTES, SE PUSO DE MANIFIESTO UN REQUERIMIENTO ADICIONAL PARA LA EXPRESION DE ALD: EL FACTOR FNR (POSIBLE ZONA OPERADORA DEL NT -3 AL -16) TANTO AEROBICA COMO ANAEROBICAMENTE.
LOS ESFUERZOS REALIZADOS PARA LA CARACTERIZACION DEL GEN REGULADOR DE ALD NO PERMITIERON IDENTIFICAR ESTE GEN, PERO NOS LLEVARON A LA CARACTERIZACION DE UNA CEPA (JA114) CUYA ACTIVIDAD ALDH ES TEMPERATURA SENSIBLE COMO UN MUTANTE ESTRUCTURAL CUYO FENOTIPO RESPONDE A LA CONFORMACION IRREVERSIBLE QUE ADOPTA LA CADENA PEPTIDI
