Análisis de la expresión del factor de splicing srl1 de arabidopsis thaliana implicado en mecanismos de tolerancia a estrés salino

• Autores: Lucrecia Catalina Bourgon Baquedano
• Directores de la Tesis: Óscar Vicente Meana (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Politècnica de València ( España ) en 2006
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Vicente Conejero Tomás (presid.), Marta Roldán Medina (secret.), Manuel Talón Cubillo (voc.), María del Pilar Sanchez Testillano (voc.), Vicente Pallás Benet (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
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• Resumen

  • Previamente en nuestro laboratorio y como resultado del screening funcional de una biblioteca de cDNA de Arabidopsis, se aisló el cDNA correspondiente al gen SRL1 por el fenotipo de tolerancia a sal que confería su expresión en la levadura Saccharomyces cerevisiae. La proteína codificada en dicho cDNA parecía estar implicada en el procesamiento del pre-mRNA. Ello suponía una novedosa relación entre la tolerancia a sal de las células ecuarióticas y un proceso de gran importancia en el metabolismo celular como es el procesamiento del pre-mRNA.

    El objetivo de la presente Tesis Doctoral se ha centrado en el análisis bioquímico y funcional de SRL1 y en el estudio del mecanismo de inhibición del splicing en presencia de sal. Para ello se llevó a cabo el estudio de expresión del gen SRL1 en plantas de Arabidopsis thaliana sometidas a diferentes condiciones de estrés.

    Estos estudios indicaron que dicho gen era activado transcripcionalmente en condiciones de estrés salino, temperaturas altas y bajas, estrés hídrico y tratamiento con ácido abscísico. De forma complementaria el estudio bioinformático de las secuencias promotoras del gen SRL1 indicó la presencia en las mismas de secuencias homólogas a las existentes en otros genes cuya expresión se activaba en las mismas condiciones de estrés.

    Por otra parte, en el estudio cuantitativo del fenotipo de tolerancia a sal y a sequía en plantas transgénicas de Arabidopsis que sobreexpresaban SRL1, se observó que las plantas transgénicas obtenían un mayor desarrollo tanto vegetativo como reproductivo en comparación con las no transformadas para las condiciones de estrés ensayadas.

    Mediante la técnica de RT-PCR modificada, obtuvimos la confirmación de que el procesamiento de los intrones o splicing constituía una diana de toxicidad de la sal tanto en planta como en levadura. Del mismo modo observamos que en plantas las sobreexpresión de SRL1 conseguía contrarrestar dicha inhibición.

    El emple