LA BIOSINTESIS DE LOS COMPUESTOS SECUNDARIOS ESTA NORMALMENTE RESTRINGIDA A ESTADOS PARTICULARES DEL DESARROLLO E INTEGRADA EN UN PROGRAMA ESPECIFICO DE DIFERENCIACION; POR ELLO, LA PRODUCCION DE DICHOS METABOLITOS MEDIANTE CULTIVOS "IN VITRO" RESULTA EN MUCHOS CASOS DIFICIL SI NO SE DAN PREVIAMENTE LAS CONDICIONES DE DIFERENCIACION ADECUADAS. UN CLARO EJEMPLO DE LA NECESIDAD DE DIFERENCIACION MORFOLOGICA PREVIA A LA DIFERENCIACION QUIMICA LA TENEMOS EN LA OBTENCION DE CARDENOLIDOS, PUESTO QUE UNICAMENTE LOS CULTIVOS EN LOS QUE SE MANIFIESTA, AL MENOS, A NIVEL SUBESTRUCTURAL UNA DIFERENCIACION, SON CAPACES DE FORMAR ESTOS PRINCIPIOS ACTIVOS.
POR TODO ELLO EN ESTE TRABAJO, UTILIZANDO CALLOS DE DIGITALIS PURPUREA, PRETENDEMOS ESTUDIAR LA PRODUCCION DE CARDENOLIDOS ACTIVANDO AQUELLOS PASOS DEL METABOLISMO QUE SE HALLAN BLOQUEADOS, PARA LO CUAL AÑADIMOS FENOBARBITAL AL MEDIO DE CULTIVO; EL FENOBARBITAL ES UN EFECTOR QUIMICO QUE ACTIVA CIERTOS PROCESOS ENZIMATICOS DEPENDIENTES DE CITOCROMO P450, Y ADEMAS AÑADIMOS GIBERELINA GA3, UNO DE CUYOS EFECTOS MAS CONOCIDOS ES ACTIVAR LA FORMACION DEL RETICULO ENDOPLASMATICO. TAMBIEN SE INTENTA MEJORAR LA PRODUCCION DE CARDENOLIDOS PROVOCANDO UN GRADO DE DIFERENCIACION MORFOLOGICA ADECUADO MEDIANTE LA APLICACION DE DOS AUXINAS DIFERENTES Y UNA CITOQUININA AL MEDIO DE CRECIMIENTO MANTENIENDO UNA RELACION AUXINA/CITOQUININA ADECUADA Y BAJO CONDICIONES CONSTANTES DE LUZ Y TEMPERATURA.
DE ESTE MODO PRETENDEMOS UNA MEJORA EN LA BIOPRODUCCION DE CARDENOLIDOS EN DIGITALIS PURPUREA MEDIANTE CULTIVOS "IN VITRO", ANALIZANDO A SU VEZ ALGUNOS FACTORES QUE PUEDEN INFLUIR SOBRE LA ORGANOGENESIS EN TEJIDO DE CALLO.
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