SE HA APLICADO EL METODO DE CENTRIFUGACION CONTRAFLUJO (ELUTRIACION) A SUSPENSIONES CELULARES Y NUCLEARES OBTENIDAS A PARTIR DE TESTICULO DE GALLO CON LA FINALIDAD DE OBTENER POBLACIONES CELULARES O NUCLEARES REPRESENTATIVAS DE LOS ESTADIOS DEL PROCESO DE DIFERENCIACION ESPERMATOGENICO. SE OBTIENEN LAS SIGUIENTES POBLACIONES:
C 1 O POBLACION CELULAR QUE CONTIENE ESPERMATOZOIDES TESTICULARES Y FRAGMENTOS SUBCELULARES.
C 2 O POBLACION CELULAR COMPUESTA POR ESPERMATIDAS EN ELONGACION.
C 3 O POBLACION CELULAR COMPUESTA POR ESPERMATIDAS REDONDAS, QUE SON LAS ESPERMATIDAS TEMPRANAS DEL PROCESO ESPERMIOGENICO.
C 4+5 O POBLACION QUE CONTIENE LAS CELULAS MEIOTICAS Y PREMEIOTICAS.
N 1+2 O POBLACION DE NUCLEOS ELONGADOS.
N 3 O POBLACION DE NUCLEOS QUE CONTIENE LOS QUE PROCEDEN DE LAS ESPERMATIDAS REDONDAS.
N 4+5 O POBLACION DE NUCLEOS QUE CONTIENE LOS QUE PROCEDEN DE LOS ESTADIOS MEIOTICOS Y PREMEIOTICOS.
TODO ESTE MATERIAL Y DIVERSOS TEJIDOS DE POLLO (TESTICULO MADURO, TESTICULO INMADURO EN EL QUE TODAVIA NO SE HA PRESENTADO LA MEIOSIS, HIGADO, SANGRE NORMAL Y CON RETICULOCITOSIS SUPERIORES AL 80%) HAN SIDO SOMETIDOS A EXTRACCIONES CON ACIDO PERCLORICO, QUE SOLUBILIZA SELECTIVAMENTE A LA HISTONA H1 Y A LAS PROTEINAS NO-HISTONAS HMG 1 Y 2 PERMITIENDO SU ESTUDIO. MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONALES (D1: ACETICO/UREA, D2:SDS), ESTUDIOS DE SOLUBILIDAD EN ACIDO TRICLOROACETICO AL 5%, MAPAS PEPTIDICOS CON LA PROTEASA ESTAFILOCOCICA V8 Y QUIMOTRIPSINA, Y GELES ELECTROFORETICOS DEL 18% POLIACRILAMIDA ACETICO/UREA DE LARGO RECORRIDO Y ALTA RESOLUCION, SE HAN IDENTIFICADO LOS ELEMENTOS QUE COMPONEN LA H1 Y LAS HMG 1 Y 2 DEL POLLO. CONCRETAMENTE:
SEIS SUBTIPOS DE H1 (H1A, H1A', H1B, H1C, H1C' Y H1D), UNA VARIANTE DE H1 (LA H5), UNA SOLA HMG 1 Y DOS HMG 2 (LA HMG 2A Y LA HMG 2B). SE HAN CUANTIFICADO SUS P PROPORCIONES RELATIVAS EN LOS MATERIALES ANTERIORMENTE ALUDIDOS. LOS SUBTIPOS RICOS EN ARGININA (H1C Y H1C') SE ACUMULAN CO
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