Caracterización de la región reguladora sos en el grupo alfa de las proteobacterias

• Autores: Angels Tapias Ribot
• Directores de la Tesis: Jordi Barbé García (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2000
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Ernesto García (presid.), Montserrat Llagostera Casas (secret.), Antoni Juarez (voc.), Miguel Regué (voc.), Carlos Alonso Juan (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Microbiología
      • Bacteriología
    • Biología molecular
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• Resumen

  • La construcción de fusiones transcripcionales con el gen recA y su analisis en los distintos miembros de la familia Rhizobiaceae ha permitido establecer la existencia de una regulación interespecífica, lo que a nivel funcional significa la presencia en dicha familia de una vía reguladora común para este gen. Tras determinar este punto, se abordó la caracterización molecular del motivo regulador del gen rec A de Rhizobium etli, que hemos demostrado que corresponde a la secuencia GAAC-N7-GTAC. Sin embargo, y para poder afirmar que tal secuencia era la caja SOS, era necesario disponer de otros genes pertenecientes al sistema SOS de estos microorganismos. Para ello, y mediante experimentos de complementación con cepas mutantes se aisló el gen uvrA de Sinorhizobium meliloti. Adyacente a este gen, pero con el sentido de transcripción opuesto, se detectó la presencia del gen ssb.

    El análisis de la región promotora de los dos genes nos permitió determinar que ambos eran inducibles por lesiones en el DNA y que dicha inducibilidad dependía del motivo GTTC-T7-GTTC que es la secuencia reversa y complementaria de la que, como ya seha comentado, controla el gen recA(GAAC-N7-GTAC).

    El analisis comparativo de los promotores SOS de diferentes miembros de la clase Alfa de las proteobacterias, grupo taxonómico al que pertenece la familia Rhizobiaceae, ha revelado que su caja SOS es la repetición directa GTTC-YYKTTTT-GTTC, siendo este el primer caso conocido en que el motivo regulador SOS no es de naturaleza palindrómica.

    Así mismo, se ha clonado el gen lexA de R.sphaeroides para proceder a su análisis. La construcción de una cepa mutante deficiente en este gen, ha demostrado inequívocamente que su producto, la proteína LexA, es el represor del sistema SOS y que la organización de este presenta características diferentes importantes en comparación con el de otros microorganismos caracterizados previamente. Finalmente, se ha purifica