Proceso de renaturalización del factor de crecimiento básico del fibroblasto
- Autores: David Estapé Izquierdo
- Directores de la Tesis: Ursula Rinas (dir. tes.), Francesc Gòdia Casablancas (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francesc Xavier Avilés Puigvert (presid.), Jordi Joan Cairó Badillo (secret.), Antonio Villaverde Corrales (voc.), Santiago Esplugas Vidal (voc.), Núria Verdaguer Massana (voc.)
- Materias:
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- Resumen
La aparición de agregados proteicos, conocidos como cuerpos de inclusión, son el resutlado que muy frecuentemente se obtiene de la síntesis de proteína heterologa en E. Coli recombinante. La proteína acumulada en forma de cuerpos de inclusión se caracteriza por la ausencia de su estructura tridimensional que a su vez representa la perdida de sus actividad biológica. En estos casos, es posible obtener proteína activa siguiendo un proceso de renaturalización.
El objetivo del trabajo ha sido el estudio del proceso de renaturalización del factor de crecimiento básico del fibroblasto (hFGF-2). El trabajo esta orientado desde un punto de vista ingenieril y se propone como objetivo final la definición de las condiciones i la forma más idóneas de realizar el proceso de reaturalización que habrían de favorecer la formación de proteína activa.
El trabajo esta dividido en cada uno de los pasos que componen el proceso de renaturalización. El lavado y la solubilización de los cuerpos de inclusión como pasos previos y el proceso repliegue por el cual la proteína adquiere su estructura tridimensional y a la vez su función biológica.El objetivo final ha sido identificar cada uno de los factores que tienen un papel clave en el rendimiento obtenido en cada.
El principal objetivo ha sido el estudio del proceso de repliegue. Este representa el paso limitante del proceso de reanturalización y además tienen un alto interés científico.Este se ha dividido en los dos estudios: la estabilidad de la molécula de hFGF-2 y la cinética de desnaturalización y de repliegue. Además, se incluye el análisis de los fenómenos de agregación que generalmente se observan durante el proceso de repliegue y que son los responsables de los bajos rendimientos que se obtienen.
