La diabetes tipo 1 es una enfermedad autoinmune causada por una destrucción selectiva de las células productoras de insulina. Una vez se ha declarado la enfermedad, el trasplante de islotes es uno de los posibles tratamientos para restaurar la secreción de insulina. Actualmente, el método standard para purificar los islotes pancreáticos se basa en la centrifugación en gradientes manuales.
Durante la realización de este trabajo se ha perfeccionado el método para purificar los islotes automáticamente haciendo los gradientes en el separador de células COBE 2991 y se han obtenido islotes de mejor calidad para el trasplante. También se han estudiado las causas de la disfuncionalidad primaria del injerto y se ha postulado la posibilidad de que el enzima utilizado para digerir el páncreas presentase contaminación por endotoxinas; este enzima es la colagenasa que se obtiene del sobrenadante del cultivo de la bacteria Clostridium histolyticum. Se detectaron elevadas concentraciones de endotoxina en la colagenasa y se pudo demostrar que ésta presentaba actividad endotóxica pues inducía citocinas inflamatorias en los macrófagos préviamente expuestos.
También se detectó la presencia de estas citocinas en el tejido pancreático digerido y en los islotes preparados para trasplantar. Estos resultados demuestran que el enzima utilizado en el procesamiento del páncreas puede ser uno de los factores que podrian estar afectando al posterior funcionamiento de los islotes y por lo tanto al buen funcionamiento del injerto.
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