Las ribonucleasas de plasma humano y bovino. Analisis y estudio comparativo

• Autores: M. Isabel Bravo Camison
• Directores de la Tesis: M. Victòria Noguès i Bara (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1996
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Claudi Cuchillo Foix (presid.), Maria Vilanova Brugués (secret.), Emili Itarte (voc.), Julio Alonso Farre (voc.), Juan Lorenzo Jorquera (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Enzimología
      • Inmunoquímica
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• Resumen

  • El nivel de la actividad ribonucleasa (rnaasa) en los fluidos corporales, especialmente el plasma, se ha relacionado con diversos estados patologicos. Estos estudios son contradictorios debido a la metodologia utilizada, y a la heterogeneidad de las rnaasas presentes en estos fluidos. En los ultimos años, se han descubierto un gran numero de proteinas con diferentes funciones, que presentan en comun una gran homologia de secuencia y actividad rnaasa. Algunas de estas rnaasas nuevas se han detectado en el plasma humano. En este trabajo se han desarrollado protocolos de separacion de las rnaasas presentes en el plasma y orina humana y en el plasma bovino, basados en columnas de intercambio ionico. Para la caracterizacion de estas rnaasas se han puesto a punto tecnicas especificas y sensibles, basadas en ensayos inmunologicos y enzimaticos. Se han obtenido anticuerpos contra las rnaasas de tipo 1 y 2; estos ultimos, se han obtenido a partir de un peptido sintetico del extremo n-terminal de la proteina. El analisis de la inmunoinhibicion de la actividad rnaasas de la rnaasa de tipo 2 o edn, con estos anticuerpos, ha indicado que la union a la proteina no afecta a los residuos implicados en la actividad catalitica de esta. La separacion y caracterizacion de las rnaasas presentes en el plasma humano indica, que la heterogeneidad existente es debida a diferentes tipos de cadenas polipeptidicas y grados de glucosilacion. Estas rnaasas se han clasificado e identificado con las descritas en los diferentes tejidos. Se ha detectado una nueva rnaasa con actividad de tipo secretor, no inmunorreactiva con los anticuerpos utilizados. En el plasma humano no se ha detectado la presencia del inhibidor proteico de la rnaasa. En la orina humana se observa un patron de actividad rnaasa diferente del observado en el plasma. La heterogeneidad es debida, sobretodo, a diferentes grados de glucosilacion. Se han detectado, unicamente, rnaasas de tip