Estudio de la expresion y analisis del promotor del gen tubalfa1 del maiz (zea mays l.)

• Autores: Miguel Ángel Torres Lacruz
• Directores de la Tesis: Joan Rigau Lloveras (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1995
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Enrique Querol Murillo (presid.), Oriol Cabré Fabré (secret.), Juli Peretó (voc.), Manuel Echeverria (voc.), Lluis Cornudella (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
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• Resumen

  • El gen tubalfa1 codifica una alfa-tubulina de maiz. Se han descrito en sistemas eucariotas la existencia de familias multigenicas de tubulines que codifican los diferentes isotipos detectados. En el caso del maiz, se han caracterizado en nuestro laboratorio tres genes que por estudios de northern muestran algunas diferencias, aunque todos se expresan en regiones meristematicas. En este estudio se ha caracterizado el patron de acumulacion de mensajeros del gen tubalfa1 por hibridacion in situ, en diferentes organos del maiz. Se ha observado una acumulacion de mensajeros del gen en tejidos meristematicos ricos en celulas en division, con un patron muy similar al observado para la histona h3. Tambien se han detectado diferencias respecto a la expresion de otro gen de alfa-tubulina, el gen tubalfa3. Para estudiar las secuencias responsables de este patron de expresion se han realizado una serie de fusiones transcripcionales con diferentes deleciones en 5' del promotor del gen, con el gen testigo de la beta-glucuronidas (gus). El estudio de las plantas de tabaco transformadas con estas construcciones ha permitido observar que el promotor del gen tubalfa1 puede dirigir la expresion del gen gus a tejidos similares a donde se expresa el gen en maiz. El analisis de la expresion de las diferentes construcciones ha permitido acotar una zona de 200 pb donde se encontrarian los elementos responsables de la expresion en raiz. Finalmente se han realizado estudios de interaccion dna-proteina con sondas del promotor que corresponden a esta region importante para la regulacion de la expresion en raiz. Se ha observado la formacion de dos complejos retardados con caracteristicas de union diferentes. Un complejo c1 que interacciona a nivel de una secuencia rica en g/c, identificada mediante estudios de footprinting. Otro complejo c2 se ha observado en esta misma region, cuya interaccion se produce a nivel de secuencias ricas en a/t. Se han ob