An experimental approach to oxidative stress effect on sperm motility and dna fragmentation
- Autores: Sara Sadeghi Khomami Sadeghi Khomami
- Directores de la Tesis: Miguel Angel Silvestre Camps (dir. tes.), Carles Soler (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 2018
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Francisco Pertusa Grau (presid.), Pilar Santolaria Blasco (secret.), Ernesto Ángel Gómez Blasco (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biomedicina y Biotecnología por la Universitat de València (Estudi General)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: TESEO
- Resumen
En el estudio de la fertilidad masculina en todas las especies animales, la movilidad espermática, junto a la concentración y morfometría son los parámetros principales y más básicos en la evaluación de la calidad de los espermatozoides. La infertilidad masculina habitualmente se asocia con tasas anormales de estos parámetros seminales. Aún teniendo, los espermatozoides tasas adecuadas de todos estos parámetros no se puede garantizar la capacidad de fertilizar y/o desarrollar un cigoto.
Por lo tanto, está claro que el examen rutinario del semen y los espermatozoides en la eyaculación no puede evaluar otros parámetros importantes en el proceso de fecundación como es capacitación espermática o detectar la fragmentación del ADN o la disfunción mitocondrial de los espermatozoides. El ADN del esperma juega un papel crítico en el desarrollo normal del embrión ya que la información genética transmitida a la próxima generación depende de la integridad del ADN del esperma.
Los trabajos de investigación de los que consta esta tesis se realizaron con el objetivo de utilizar modelos animales para esclarecer la mejor manera de medir la fragmentación del ADN de manera lo más objetiva posible, en muestras de semen y evaluar el efecto del estrés oxidativo sobre la viabilidad y motilidad de los espermatozoides. Para este fin, se realizaron cuatro experimentos, pero solo tres de ellos se presentan en este documento. En primer lugar, para establecer las condiciones de activación de los espermatozoides del pez, fue necesario estudiar el efecto de los medios de activación en un rango de osmolaridad y tiempo de almacenamiento y evaluar los parámetros de motilidad espermática a lo largo del tiempo en el pez cebra (Danio rerio).
En el Experimento 2, se estudió cómo el H2O2, como uno de los agentes importantes del estrés oxidativo, podría afectar al nivel de fragmentación del ADN y la movilidad de los espermatozoides en el pez cebra. Sin embargo, las mediciones del área del halo de la cabeza del espermatozoide no estaban coincidentes con la tasa subjetiva de fragmentación del ADN espermático (SDF).
En este sentido, se demostró, por primera vez, una evolución de la fragmentación del ADN utilizando criterios morfométricos en esperma humano (Experimento 3). El experimento final (Experimento 4) se incluye como un resumen extendido en el Anexo 2. En este experimento, se usaron machos cabríos de Murciano-Granadina para evaluar la correlación entre las condiciones de conservación de semen refrigerado y la integridad del ADN, nivel de oxidación y actividad mitocondrial en espermatozoides utilizando la tecnología de citometría de flujo para su evaluación.
Los resultados del Experimento 1 mostraron como la tasa de movilidad de los espermatozoides era más elevada y que su duración se prolongaba cuando la activación se realizaba en el medio de activación con la osmolalidad más alta. Con respecto a los parámetros cinéticos, observamos que casi todos los parámetros de velocidad (VCL, VSL y VAP) aumentaron significativamente en un medio con la osmolalidad alta. La movilidad total y los valores de velocidad de los espermatozoides fueron significativamente menores después de su conservación a 4 ° C durante 24 h
