Papel de la exonucleasa trex1 en el procesamiento del dna monocatenario e implicaciones en la activación de los macrófagos
- Autores: Maria Serra Sarasa
- Directores de la Tesis: Antonio Celada Cotarelo (dir. tes.), Jorge Lloberas Cabero (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2009
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Ángel Luis Corbi Lopez (presid.), Annabel Fernández Valledor (secret.), Dolores Jaraquemada Pérez de Guzmán (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Resumen de la Tesis: La proteína TREX1 es responsable de la mayor parte de la actividad exonucleasa 3'5' detectable en las células de mamífero. El principal sustrato de TREX1 es el DNA monocadena (ssDNA) y la actividad deficiente de esta proteína conduce al desarrollo de autoinmunidad tanto en el ratón como en los humanos. En todos los casos, se desarrolla un fenotipo caracterizado por la producción crónica de interferones en ausencia de infección viral. En humanos, las mutaciones en el gen que codifica para TREX1 dan lugar al Síndrome De Aicardi-Goutières (AGS) . Además, determinados polimorfismos en TREX1 están asociados con el desarrollo del Lupus Sistémico Eritematoso. Estas observaciones ponen de manifiesto la importancia de la correcta digestión del DNA monocadena para evitar una anómala reacción inmunitaria.
En este trabajo hemos demostrado por primera vez que el mRNA de TREX1 se expresa mayoritariamente en tejidos del sistema inmunitario. Tanto el mRNA de TREX1 como la proteína se expresan en células inmunitarias, siendo sus niveles especialmente elevados en los macrófagos. La expresión de TREX1 se induce por los estímulos proinflamatorios como el IFN-, el LPS o el TNF-. Mediante la inhibición de la expresión de TREX1 por siRNA demostramos que la deficiencia de TREX1 en estas células conduce a un acúmulo de DNA monocadena durante la activación del macrófago, así como a la fosforilación de p53, lo que conduce a una menor recuperación de la parada del ciclo celular y a una mayor apoptosis en respuesta al estímulo activador. Mediante experimentos de microarrays, demostramos que 2 genes clave en la respuesta inmunitaria como son la molécula presentadora CD1d1, y el coestímulo CD86 están sobreexpresados en los macrófagos deficientes en TREX1. Por último, hemos caracterizado la regulación de la expresión de TREX1 en los macrófagos en respuesta al IFN-El IFN-induce la expresión de TREX1 de forma temprana a nivel transcripcional y de manera independiente de síntesis proteia. Los factores de transcripción STAT1 y C-JUN son reclutados en el promotor de TREX1 en respuesta al IFN-y son esenciales para la expresión de TREX1 en respuesta a esta citocina.
