Quinasas de proteína en cotiledones de cucumis sativus l.: control vía fitocromos y oscilador endógeno

• Autores: Fagua Virginia Alvarez Florez
• Directores de la Tesis: Esther Simon Martínez (dir. tes.), M. Dolores Vidal Mas (codir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2009
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José María Torne Cubiro (presid.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología vegetal (botánica)
      • Desarrollo vegetal
      • Fisiología vegetal
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• Resumen

  • Esta tesis se ha desarrollado en la Unidad de Fisiología Vegetal de la Universidad de Barcelona y el objetivo general fue investigar la existencia de posibles quinasas de proteína (PKs) en cotiledones etiolados de Cucumis sativus, capaces de actuar como intermediarias en las vías de transducción de los phys durante la desetiolación. Para ello se utilizaron plántulas etioladas de Cucumis sativus a las que se irradiaron con diferentes tratamientos de luz roja (R) y roja lejana (FR). También se realizaron muestreos en oscuridad continua durante ciclos de más de un día para determinar la ritmicidad circadiana de la quinasa de caseína 2 (CK2). Se utilizaron, entre otras, las técnicas de fosforilación in vitro, fosforilación en gel, técnicas de inmunodetección y de inmunoprecipitación para purificar las PKs.

    Los resultados más relevantes del trabajo fueron: 1) la caracterización de seis PKs en los extractos de cotiledones etiolados de C. sativus, mediante la aplicación de sustratos exógenos, de promotores e inhibidores y de anticuerpos específicos de las mismas. Dos de estas PKs son de tipo quinasas de proteína dependientes de calcio (CDPKs) de 75 y 57 kDa; otras dos de tipo quinasas de proteínas activadas por mitógenos (MAPKs) de 47 y 45 kDa y las dos restantes son de tipo quinasas de caseína (CKs) de 38 y 36 kDa. 2) Las seis PKs caracterizadas presentan una importante capacidad de autofosforilación. 3) La actividad de las dos CDPKs caracterizadas en los extractos de C. sativus, se estimula a través de respuestas de tipo VLFR y FR-HIR de fitocromos. 4) La actividad MAPK incrementa transitoriamente en respuesta a cortas irradiaciones de R y FR a través de una respuesta de tipo VLFR. 5) De las dos CKs caracterizadas, la de 38 kDa corresponde a una PK de tipo CK2, mientras que la de 36 kDa corresponde a una PK de tipo CK1. 6) Se demostró que la actividad CK2 presenta ritmicidad circadiana, tanto en la fosforilación de caseína exógena como en la autofosforilación.