Transferencia génica fetal en un modelo de coneja gestante. Optimización de vectores retrovirales para una mayor eficiencia, seguridad y persistencia de la expresión transgénica

• Autores: Rafael Moreno Olié
• Directores de la Tesis: Josep Maria Aran Perramon (dir. tes.), Eduardo Gratacós Solsona (codir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Barcelona ( España ) en 2008
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Cristina Fillat Fonts (presid.), Elena Mercade Gil (secret.), Miguel Chillón Rodríguez (voc.), Ramon Alemany Bonastre (voc.), Bienvenido Puerto Navarro (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Genética
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • En la presente Tesis Doctoral se han desarrollado dos líneas principales de investigación. En primer lugar se ha pretendido evaluar la eficiencia, seguridad y persistencia de la transferencia génica y celular fetal en un modelo de coneja gestante. Cuando a finales de 2001 se inició este proyecto de terapia génica prenatal, en la literatura científica se empezaban a publicar los primeros ensayos de transferencia génica in utero. A partir de los resultados que se iban divulgando quedaba patente la existencia de ciertas limitaciones en la transferencia prenatal y la necesidad de llevar a cabo experimentos adicionales, en diversos modelos animales, empleando nuevos vectores de transferencia y con aproximaciones experimentales originales, que permitiesen determinar el potencial terapéutico de la transferencia génica prenatal. Es por ello que el objetivo de nuestro grupo ha sido el de contribuir a este proceso de validación mediante ensayos de transferencia prenatal en el modelo de coneja gestante.

    En segundo lugar, se han llevado a cabo experimentos cuya finalidad ha sido la optimización de vectores retrovirales para una mayor eficiencia, seguridad y persistencia de la expresión transgénica. Entre las principales limitaciones que presentan los vectores retrovirales se encuentran los fenómenos de silenciamiento y variegación génica observados en numerosos estudios de transferencia génica. El descubrimiento en los últimos años de distintas secuencias genéticas como los aisladores o las secuencias de unión a la matriz (S/MAR), secuencias ambas que parecen tener un efecto positivo sobre la expresión transgénica a partir de vectores retrovirales, ha permitido desarrollar una nueva área en la optimización de vectores. En este sentido, en nuestro grupo hemos estudiado la optimización de un vector retroviral mediante la incorporación de las dos versiones cortas de aislador 5'HS4 de la ß-globina de pollo (core y core¿¿¿) y del fragmento SAR de 800 pb del interferon- ß humano.