Resumen de Validación de un nuevo antígeno recombinante para el diagnóstico y seguimiento de pacientes con hidatidosis y su aplicación a un test comercial
- español
VALIDACIÓN DE UN NUEVO ANTÍGENO RECOMBINANTE PARA EL DIAGNÓSTICO Y SEGUIMIENTO DE PACIENTES CON HIDATIDOSIS Y SU APLICACIÓN A UN TEST COMERCIAL.
Basándonos en los resultados previos obtenidos con el recombinante B2t en el diagnóstico de pacientes con hidatidosis, construimos nuevos recombinantes derivados del mismo (2B2t, 4B2t y 8B2t). El 2B2t fue superior en cuanto a nivel de producción y eficiencia diagnóstica en la técnica ELISA para la detección de IgG en suero. Este nuevo antígeno fue comparado con otras técnicas de uso rutinario como son el antígeno líquido hidatídico (LH) en ELISA y un test comercial de hemaglutinación, mejorando los resultados obtenidos por estos dos tests.
El resultado de todos los tests ensayados depende de variables clínicas del paciente, lo que indica que para poder definir el valor diagnóstico de cualquier test serológico será necesaria una evaluación de dichas variables. Existe una correlación directa entre la actividad parasitaria, el número de quistes y la aplicación de tratamiento, y la positividad frente al LH y a los antígenos recombinantes B2t y 2B2t.
Los antígenos B2t y 2B2t se mostraron útiles en el seguimiento de pacientes tras cirugía o una técnica de aspiración. En pacientes tras un tratamiento farmacológico, el declinar de los anticuerpos específicos frente a los recombinantes es útil para determinar la curación siempre que se acompañe de una técnica de imagen. En el caso de pacientes en watch and wait, el serodiagnóstico con estos recombinantes no es útil para definir su curación.
El 2B2t aplicado a tiras inmunocromatográficas resultó en un producto comercial para el diagnóstico de la hidatidosis, económico, sencillo y con mayor eficiencia diagnóstica que los tests ensayados durante esta Tesis, y con potencial para ser utilizado también en el seguimiento de pacientes tratados.
La aplicación de anticuerpos policlonales frente a B2t en el mismo formato permite la detección de antígenos B específicos del género Echinococcus, por lo que es aplicable al diagnóstico diferencial de lesiones quísticas de otra naturaleza.
- English
VALIDATION OF A NEW RECOMBINANT ANTIGEN FOR THE DIAGNOSIS AND MONITORING OF CYSTIC ECHINOCOCCOSIS PATIENTS AND ITS USE IN A COMMERCIAL TEST.
Based on previous results obtained with recombinant B2t in the diagnosis of patients with cystic echinococcosis, here the new recombinant derivatives are obtained (2B2t, 4B2t and 8B2t). The 2B2t was the best in terms of production and diagnostic efficiency in ELISA for the detection of serum IgG. This new antigen was compared with other techniques routinely used as the ELISA with hydatid fluid antigen (HF) and a commercial hemagglutination test, improving the results obtained by these two tests.
The results of all tests depend on the patient's clinical variables, indicating that the definition of the diagnostic value of any serological test will require an assessment of these variables. A direct correlation exists between parasitic activity, the number of cysts and the application of treatment, and the positive results against the HF and the recombinant antigens 2B2t and B2t.
B2t and 2B2t antigens were also useful in monitoring patients after surgery or an aspiration technique. In patients after drug treatment, the decline of specific antibodies against the recombinants is useful to determine healing if accompanied by an imaging technique. For patients in watch and wait, the serodiagnosis with these recombinants is not useful to define cure.
The 2B2t was applied to immunochromatographic strips, ending up in a commercial product for the diagnosis of cystic echinococcosis that is cheap, easy to perform and the most efficient diagnostic tool tested during this thesis, with potential to be also used in monitoring patients.
The application of polyclonal antibodies against B2t in the same format allows the detection of Echinococcus antigen B, making it applicable to the differential diagnosis of cystic lesions.
KEYWORDS: cystic echinococcosis, serodiagnosis, recombinant antigen.
