Proteasas de sumo en la interacción planta-patógeno

• Autores: Carlos Martin Guevara
• Directores de la Tesis: Francisco Javier Ruiz Albert (dir. tes.), Eduardo R. Bejarano (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Málaga ( España ) en 2010
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Rafael Lozano Ruiz (presid.), Carmen del Rosario Beuzón López (secret.), Pablo Tornero Feliciano (voc.), José Carlos Reyes Rosa (voc.), Herlander Anselmo Pereira Azevedo (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Genética
      • Ingeniería genética
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• Resumen

  • TÍTULO DE LA TESIS: PROTEASAS DE SUMO EN LA INTERACCIÓN PLANTA-PATÓGENO RESUMEN: La sume-ilación es un proceso eucariota de modificación postraduccional similar a la ubiquitinización, que consiste en la unión covalente a ciertas proteínas de un pequeño péptido denominado SUMO (Small Ubiquitin-related MOdifier), lo que puede alterar diversas características funcionales de la proteína modificada. La sumoilación es un proceso celular esencial, tanto en animales como en plantas, y que constituye una diana para proteínas de virulencia de virus, hongos y bacterias. En nuestro trabajo nos vamos a centrar en las proteasas de SUMO de Arabidopsis Thaliana Ulp. Se obtuvieron mutantes mediante inserción de T-DNA de la base de germoplasma de TAIR de estos dos genes, los mutantes fueron analizados y se seleccionaron los dobles homocigóticos para la inserción. Los mutantes simples no presentaban ningún fenotipo morfológico, en cambio el doble mutante presentó un adelanto en la floración con respecto a los mutantes simples y al wild-type Columbia-0, así como un acortamiento de la raíz primaría en crecimiento vertical en medio MS.Los mutantes simples presentan un ligero aumento en la resistencia a la infección por Pseudomonas syríngae pv. tomato (DC3000), este aumento se muestra significativo en el doble mutante, presentando un crecimiento bacteriano disminuido cinco veces. Estudios mediante PCR a tiempo real confirman una mayor expresión de los genes marcadores de las rutas de respuesta tanto de ácido salicilico como ácido jasmónico, dichas rutas están implicadas en la respuesta de defensa a patógenos, una mayor expresión de estos genes nos sugiere una respuesta más eficiente y portante, justifica la mayor resistencia al patógeno presentada en los experimentos de multiplicación bacteriana. Numerosas bacterias patógenas Gram negativas utilizan sistemas de secreción especializados, denominados sistemas de secreción tipo III (TTSS), para introducir proteínas de virulencia (efectores) directamente al citosol de su hospedador. Dichos efectores interfieren con diversos procesos celulares eucarlotas, para beneficio de la bacteria. Entre los procesos afectados se encuentra la sumoilación. En este trabajo hemos realizado una búsqueda de proteínas de la planta que constituyan dianas de efectores de la familia HopZ, efectores que presentan notable parecido de secuencia con proteasas de SUMO y están presentes en diversos patevares de la bacteria fitopatógena Pseudomonas syríngae. Para dicha búsqueda aplicamos el sistema del doble híbrido en levaduras para escrutar una genoteca de la planta modelo Nicotiana benthamiana, utilizando los efectores HopZIp¿, HopZ1psy, HopZ2 y HopZ3 como cebo. Las primeras rondas de escrutinio, todavía no saturantes, nos han permitido identificar una serie de posibles dianas comunes a todos los efectores analizados, entre las que se encuentra la ubiquitina, SUMO, así como una proteína (ELI3) implicada en la respuesta de la planta a infección por Pseudomonas syríngae, y cuya expresión se induce como respuesta a tratamiento con ácido salicilico.