Determinantes moleculares de la interacción de los canales de k+ con los cationes extracelulares
- Autores: Patricia Ortega Sáenz
- Directores de la Tesis: Antonio Gonzalo Castellano Orozco (dir. tes.), José López Barneo (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Sevilla ( España ) en 1998
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Anunciación Ana Ilundáin Larrañeta (presid.), Juan Ureña López (secret.), Josefina Cano García (voc.), Marçal Pastor Anglada (voc.), Emilio Fernandez Reyes (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
Los canales de Potasio dependientes de voltage son proteinas tetraméricas que poseen aminoácidos cargados negativamente (E y D) al pH fisiológico.En el trabajo de esta tesis hemos estudiado el papel funcional de algunos de estos resíduos aminoacídicos localizados en la superficie externa de estas proteinas, realizando mutaciones del canal shaker y expresandolas de forma transitoria en células CHO. La neutralización de la mayoría de las cargas negativas externas no afectaron ni a los mecanismos de compuesta ni la conducción através del poro del canal. Sin embargo la neutralización del glutámico en posición 418 (mutante E418Q) produjo un canal con una cinética de anactivación "tipo C"100 veces más rápida que la del canal nativo. Igualmente la constante de cierre del canal se redujo unas cinco veces, no afectandose para nada la cinética de activación del canal. El potasio extracelular produjo un incremento del número de canales abiertos así como un en lentecimiento de las cineticas de inactivación y cierre.
Por el contrario la mutación E418D que modifica el resíduo en esta posición sin modificar la carga, dio lugar a un canal sin diferencias cinéticas apreciables respecto al canal silvestre. Estos datos indican que elglutamato en posición 418, altamente conservado en los canales de potasio dependientes delpotencial de membrana, determina el flujo de iones através del canal, el numero de canales que abre en respuesta a una determianda despolarización y las cinéticas de cierre e inactivación. El mecanismo que postulamos para explicar estos efectos se basa en el hecho de que la carga negativa localizada en la zona externa del canal próxima al poro de conduccióno incluso en la boca de este, actua colectando cationes (fundamentamente monovalentes) en la boca del canal, aumentando con ello la probabilidad de ocupación del poro por potasio. La eliminación de esta carga negativa disminuye por tanto la probabilidad de
