Identificacion aislamiento y caracterizacion de una fosfoglicoproteina en la orina de litiasicos con actividad nucleante en la precipitacion de oxalato

• Autores: José Luis Paternain Suberviola
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1988
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Claudi Cuchillo Foix (presid.), Jorge Joven Maried (secret.), Joan Maria Llobet Mallafré (voc.), Francisco Javier Ruíz Marcellán (voc.), Carles Arús Caraltó (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Proteínas
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Patología experimental
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• Resumen

  • La litogenesis renal comienza con la deposicion de la fase solida a partir de los componentes cristalinos en disolucion en orina. Sus niveles de saturacion en la orina determinaran su capacidad de nucleacion. En la zona metaestable de sobresaturacion la nucleacion no es espontanea sino inducida por agentes extraños al material precipitado y se produce la llamada nucleacion heterogenea. Se identifico en las proteinas de la orina de litiasicos una actividad nucleante heterogenea en la precipitacion de oxalato. La actividad se media añadiendo en el volumen final de 1 ml: tampon fosfato sodico 0 5 mm ph 7 5 cacl sub 2 0 75 mm a. Oxalico 0 5 mm 5x10 elevado a 4 cpm de a. Elevado a 14 c-oxalico y cantidades crecientes de proteinas desde 0 hasta 100/ug. Tras 4 horas de incubacion a 4 grados centigrados se determino la radiactividad de los precipitados. La actividad especifica se valoro como la pendiente maxima de la relacion lineal del oxalato precipitado con respecto a las proteinas añadidas. Se purifico a partir de la orina de litiasicos oxalo-fosfo-calcicos una proteinaresponsable de la actividad nucleante promotora de la precipitacion de oxalato. Esta proteina resulto homogenea en electroforesis en poliacrilamida-sds equilibrio de sedimentacion en ultracentrifuga y residuo n-terminal. En el analisis de composicion observo la presencia mayoritaria de residuos acidos glu asp junto a ala y gly. Se valoro un bajo contenido en residuos aromaticos y sulfurados. Se caracterizo la presencia de residuos modificados de pser y gla.Como constituyentes hidrocarbonados se apreciaron hexosas (10 6%) hexosaminas(1 2%) y acidos hexuronicos (2 6%). Tambien se detecto fosforo organico (3 9%). Su peso molecular fue de 56200d mediante filtracion en geles y 56600d por equilibrio de sedimentacion. Se comporto de modo anormal en la electroforesis enpoliacrilamida-sds variando sus pesos moleculares entre 44500 y 48200 d. La forfoglico