Resumen de Estudi de les interaccions de les proteines no-histones hmg1 i hmg2 amb els oligomers d'histones la cromatina i el dna

Jordi Bernués Martínez

• El estudio de las interacciones en solucion de las no-histonas hmg1 y hmg2 con los oligomeros de histonas mediante tecnicas de entrecruzamiento quimico y analisis por electroforesis en una y dos dimensiones indica que ambas proteinasinteraccionan con las histonas h1 h2a h2b y h3; no se ha observado su interaccion con la h4. Se ha determinado que con las histonas h2a y h2b interaccionan a traves de su dominio c-terminal y con la h3 a traves del n-terminal. Al objeto de proseguir el estudio en cromatina se ha estudiado la reconstitucion de las hmg1 y hmg2 en cromatina de higado de rata por dialisis descendente y analisis en gradientes de ultracentrifugacion. Los resultados indican que las hmg1 y hmg2 reconstituyen muy preferentemente con los oligonucleosomas mas pequeños tanto en cromatina con o sin h1. En cromatina sin h1 tambien se observa una cierta reconstitucion con los oligonucleosomas mas largos aunque minoritaria. Cuando la cromatina reconstituida se entrecruza quimicamente y se analiza se observa que las hmg1 y hmg2 internaccionan con lasmismas histonas que en solucion a excepcion de la h3 que no se ha observado. Estas interacciones se realizan con toda la particula nucleosomal sin que existasubstitucion de ninguna histona. Como resultado previo se ha observado que la hmg1 pero no la hmg2 puede fijar cantidades moderadas de ca2+ de forma reversible y dependiente del ph a traves de su dominio c terminal. El estudio con dna se ha realizado con dos plasmildos mixtos derivados del pbr322 y el virus del papiloma bovino-1 (pbpv) y el de simio 40 (psv40). Se ha observado quelas hmg1 y hmg2 protegen de la digestion una diana acc i situada en el fragmento derivado de pbr322 en pbpv pero no en psv40. Se trata de una estructura alterada de dna dependiente de la superhelicidad inducida por una secuencia vecina de bpv-1 posiblemente un enhancer y reconocida por las hmg1 y hmg2. Las estructuras alteradas hipersensibles a s1 en