Interaccio de la ribonucleasa a de pancreas bovi amb el seu substrat el rna. Estudis per modificacio covalent amb lliganos clorats i per 1h-rmn
- Autores: Julio Alonso Farre
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1987
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: G. Gavilanes (presid.), Carles Arús Caraltó (secret.), Manuel Rico (voc.), Pere Puigdomènech i Rosell (voc.), Livio Paolillo (voc.)
- Materias:
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- Resumen
En esta tesis se presenta un estudio sobre la modificacion covalente de la ribonucleasa a con el 6-cloropurina ribosido para obtener informacion sobre el papel de la mitad nucleosidica en la interaccion enzima-substrato. Se modificaron los grupos amino de las lys-1 -37 -41 y 91. La especificidad de la reaccion es independiente de la relacion molar ligando/enzima utilizada. Todos estos resultados junto con la inhibicion observada cuando en el medio de reaccion se añaden nucleosidos y los estudios cineticos sugieren la existencia en la enzima de zonas de interaccion especificas para la parte nucleosidica del rna. Los estudios por rmn sobre la interaccion entre la rnasa a y didesoxinucleosidos monofosfato han permitido concluir: que el tpda es el ligando que interacciona mejor en b1r1p1b2r2 porque se produce el mejor reconocimiento mutuo; que el grupo fosfato fija el ligando en el centro activo pero que son las partes nucleosidicas las que determinan la interaccion final en base a la especificidad; que hay una interaccion directa entre la his-119 y el grupo fosfato que interacciona en p1; finalmente estan de acuerdo con la existencia del centro de interaccion b3r3p2 cerca de la region n-terminal de la rnasa a como se habia postulado por trabajos previos. Por ultimo se ha puesto a punto un metodo de separacion de derivados del rna por hplc en condiciones isocraticas que se ha aplicado a la separacion de nucleosidos 3 - y 5 - nucleotidos asi como a las de nucleotidos ciclicos y halogenados.
