Resumen de Influencia de la inclusión de n-acetil-cisteína en una solución de irrigación sobre las concentraciones intraoculares de glutation
INTRODUCCION: El Glutation (GSH) es un tripeptido presente en los tejidos oculares normales y su papel principal es proteger frente al estrés oxidativo. La vitrectomía es una cirugía intraocular que genera inflamación y daño oxidativo en las estructuras oculares y que podría ser prevenido mediante el aporte de GSH exógeno en el líquido de irrigación ocular. La N-Acetil-Cisteína (NAC) es una sustancia antioxidante y demostrado precursor de aminoácido cisteína y GSH intracelulares.
OBJETIVO: En este trabajo de investigación se pretende demostrar la capacidad captación y síntesis intracelular de L-cisteína y de GSH en las células de los tejidos intraoculares sometidos a estímulo oxidativo quirúrgico incorporando N-Acetil-Cisteína (NAC) a una solución de irrigación para vitrectomía.
MATERIAL Y METODO: Se realizó vitrectomía a 72 ojos de conejos albinos con tres diferentes soluciones de irrigación intraocular (SII): solución A: BSS plus® (n=24), solución B: BSS plus-like sin GSSG (n=24) y solución C con N-Acetil-Cisteína (n=24).
Los niveles de Glutation reducido (GSH), glutation oxidado (GSSG), cisteína y NAC a las 3 y 48 horas de la cirugía en la retina, cristalino y vítreo se midieron mediante HPLC.
Los resultados se compararon con un grupo control de ojos de conejo albino no vitrectomizados (n=15). El tratamiento estadístico de los datos se realizó mediante teest no paramétricos de Kruskal-Wallis y de Mann-Withney.
RESULTADOS 1. En primer lugar se analizaron las concentraciones basales de GSH, GSSG, cisteína y cociente GSSG/Glutation total en cristalino, retina y vítreo en el grupo control.
2. Análisis de los resultados obtenidos en los grupos vitrectomizados con las diferentes SII 2.1. En el cristalino: GSH: No se encontraron diferencias estadisticamente significativas en las concentraciones de GSH en cristalino de los ojos operados con cada una de las tres soluciones de irrigación.
GSSG y cociente GSSG/Glutation total: La solución C aumentó de forma significativa estos valores a las 3 y 48 h. No se encontraron diferencias entre las soluciones A y B.
Cisteína: Las soluciones A y C elevaron significativamente la concentración de aminoácido cisteína a las 3 h (SII A) y a las 48 h (SII C).
2.2 En la retina: GSH: Las tres SII empleadas elevaron la concentración de GSH en retina respecto al valor basal tanto a las 3 como a las 48 h de la intervención quirúrgica, sin diferencias entre ellas. A las 48 h, las SII A y C elevaron el GSH retiniano de forma significativa comparado con la B.
GSSG y cociente GSSG/Glutation total: La SII A produjo un descenso significativo de estos parámetros comparado con el grupo control, así mismo presentó los valores más bajos comparados con los grupos operados con la SII B a las 48 h y C a las 3 y 48 h. La SII B elevó de forma significativa la concentración de GSSG y de la relación GSSG/glutation total a las 3 y 48 h.
La SII C no mostró diferencias significativas con ningún otro grupo.
Cisteína: Las tres SII A, B y C elevaron significativamente la concentración de cisteína en la retina con respecto a los valores basales, sin mostrar diferencias entre sí.
2.3 En el vítreo: GSH: La SII A mostró los niveles más elevados a las 3 h de la vitrectomía. En el resto de grupos se produjo una reducción respecto a los valores basales.
GSSG: Las tres SII elevaron significativamente los niveles de GSSG en vítreo, siendo los valores más elevados para la SII A.
Cisteína: La SII C elevó significativamente la concentración de cisteína comparado con los otros grupos.
DISCUSIÓN: La vitrectomía es una técnica quirúrgica intraocular que resuelve importantes patologías de retina y vítreo causantes de ceguera. Tiene, no obstante, complicaciones derivadas de su complejidad instrumental y técnica generando trauma, inflamación intraocular y estrés oxidativo que son causas del edema de córnea, catarata, glaucoma y del edema de retina postquirúrgicos y que vienen a dificultar la recuperación funcional de los ojos inteervenidos.
Para su realización la vitrectomía requiere la infusión constante de una solución de irrigación intraocular (SII) que sustituya al vítreo aspirado. Esta SII entra en contacto directo con los tejidos oculares durante la intervención y el postoperatorio inmediato aportando los nutrientes esenciales.
La SII ideal debería tener una composición similar a los fluídos oculares fisiológicos: iones, glucosa como fuente de energía, un sistema tampón y un sistema redox para neutralizar los radicales libres producidos en la cirugía.
El Gluation reducido (GSH) es un antioxidante presente de forma natural en las células de la córnea, cristalino y retina siendo esencial para mantener la estructura y función de tales células y tejidos. La fuente fisiológica de GSH es la síntesis endógena a partir de sus aminoácidos constituyentes (glutámico, cisteína y glicina), siendo determinantes la concentración de L-cisteína y la actividad del enzima gamma-glutamil-cisteína sintetasa.
En este trabajo de investigación se ha pretendido demostrar la capacidad de captación y síntesis intracelular de L-cisteína y de GSH en las células oculares sometidas a estímulo oxidativo quirúrgico, incorporando a la SII un fármaco, la N-Acetil-Cisteína como precursor de L-cisteína.
Los resultados en cristalino de ojos vitrectomizados usando como SII la solución C, que incorpora NAC, demuestran un claro beneficio para dicha estructura ya que esta SII aumenta los niveles totales de glutation y mantiene estable la concentracción de la fracción reducida, GSH.
Los resultados observados en la retina indican que la NAC penetra en la retina de los ojos operados, donde aumenta la concentración del aminoácido cisteína. Paralelamente la elevación de los niveles de GSH en retina sugieren que esta cisteína aportada exógenamente se incorpora al ciclo celular para la síntesis de glutation.
En el gel vítreo la SII C mostró unos elevados niveles de cisteína lo que sugiere que la NAC es hidrolizada y convertida en cisteína, disponible para la síntesis intracelular de GSH.
Con todos estos datos se puede concluir que el líquido de infusión para vitrectomía que incluye NAC en su composición sería una excelente SII ya que eleva las defensas antioxidantes de la retina y del vítreo de los animales operados, por lo que su uso podría tener un efecto beneficioso en el mantenimiento de la estructura y función retiniana y la transparencia del cristalino.
