Aislamiento y caracterización del alergeno principal de sinapsis alba
- Autores: Francisco Javier Domínguez Juncal
- Directores de la Tesis: Pedro González-Porque (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1987
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Fernando Ortiz Masllorens (presid.), Enrique Mendez (secret.), José Miguel Kreisler García (voc.), Manuel Ortiz de Landazuri (voc.), Ángel Pestaña (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Se ha purificado un alergeno de sinapis alba por filtracion a traves de sephadex g-75 utilizando un enzimoinmunoensayo reverso (reia) en la deteccion de la ige especifica. Este alergeno une aproximadamente un 70% de la ige especifica frente a sinapis alba determinado mediante ensayos de inhibicion de reia y rast. El analisis por sds-page e isoelectroenfoque muestra un alto grado de pureza con un p.M. Proximo a 15.400 y un pi basico cercano al del citocromo c (pi 10 5). Este alergeno es resistente en condiciones nativas a la digestion por tripsina quimotripsina pepsina y papaina. Muestra asimismo un alto grado de estabilidad a ph acido (ph 2 0) y basico (ph 11 0) al tratamiento por agentes desnaturalizantes (urea 8 m guanidina 6 m) y a la temperatura conservando mas del 50% de su actividad despues de su calentamiento a 100 grados c durante 60 minutos. Ensayos de competicion y de puente con anticuerpos monoclonales sugieren la presencia de al menos 3 determinantes antigenicos sobre la molecula. Uno de estos anticuerpos monoclonales inhibe en un 35% la union de la ige al antigeno. Ensayos con anticuerpos monoclonales demuestran la existencia de epitopos comunes en extractos de triticum vulgare apium graveolens y cuminum cyminum. Este alergeno se localiza en el embrion y los cotiledones de las semillas desapareciendo durante la germinacion.
