Bioprospecting for Novel Thermozymes in Metagenomic Libraries from Hot Springs

• Autores: Juan José Escuder Rodríguez
• Directores de la Tesis: María-Isabel González-Siso (dir. tes.), Manuel Becerra (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidade da Coruña ( España ) en 2021
• Idioma: inglés
• Número de páginas: 244
• Tribunal Calificador de la Tesis: María Luisa Rúa Rodríguez (presid.), Ángel Vizoso-Vázquez (secret.), María Florencia Eberhardt (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biología Celular y Molecular por la Universidad de A Coruña
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: RUC
• Resumen

  • En la presente tesis doctoral se ha estudiado el metagenoma de dos fuentes termales localizadas en la ciudad de Ourense (Galicia, España): As Burgas y Muiño da Veiga. Los objetivos principales fueron la identificación y la caracterización bioquímica de enzimas termófilas y termotolerantes (termozimas) codificadas en dichos metagenomas y con posible utilidad biotecnológica, así como la secuenciación de uno de estos metagenomas para estudiar la composición de la comunidad microbiana y sus posibles interacciones metabólicas.

    Además, el estudio de la secuencia de ADN ha permitido realizar predicciones y búsquedas de nuevas termozimas, expandiendo el alcance de la técnica para la bioprospección de estos catalizadores con interés biotecnológico.

    Objetivos 1. Construir metagenotecas a partir del ADN ambiental extraído de muestras de dos aguas termales de la región de Ourense: As Burgas y Muiño da Veiga.

    2. Realizar cribados funcionales con las metagenotecas para identificar actividades enzimáticas de interés usando sustratos específicos.

    3. Secuenciar, clonar, expresar y purificar una enzima con actividad lipolítica para realizar predicciones a partir de su secuencia y para su caracterización bioquímica.

    4. Secuenciar el metagenoma de la muestra de Muiño da Veiga para realizar un análisis bioinformático que permita describir la comunidad microbiana y sus interacciones metabólicas.

    5. Analizar el metagenoma secuenciado para identificar termozimas que puedan ser clonadas y expresadas en el laboratorio.

    6. Clonar, expresar y purificar una β-xilosidasa y una endoglucanasa predichas por el análisis de secuencia para realizar una caracterización bioquímica y confirmar su potencial biotecnológico.