Caracterización funcional de Snail2 como represor de cadherina- E y como regulador del proceso de carcinogénesis química

• Autores: Patricia Molina Ortíz
• Directores de la Tesis: Amparo Cano (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2010
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Miguel Quintanilla Avila (presid.), Margarita Cervera Jover (secret.), José Manuel González Sancho (voc.), Ángel L. Corbí López (voc.), Miguel Manzanares Fourcade (voc.), Mirna Pérez Moreno (voc.), Francisco X Real (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • La pérdida de expresión de la proteína de adhesión intercelular cadherina-E es un evento esencial en el proceso de transición epitelio-mesénquima (TEM) que permite la migración celular durante el desarrollo embrionario y la invasión de las células tumorales de origen epitelial (carcinomas). La represión transcripcional es uno de los principales mecanismos de regulación de la expresión de cadherina-E, tanto en el desarrollo embrionario como durante la progresión tumoral. En los últimos años se han caracterizado diferentes represores transcripcionales del gen de cadherina-E, que a su vez inducen TEM, entre los que se encuentran los factores de dedos de zinc de la familia Snail (Snail1 y Snail2) y ZEB (ZEB-1 y ZEB-2), así como los factores de la familia bHLH (E47, E2-2 y Twist). Estudios previos de nuestro laboratorio de analisis de perfiles de expresión génica demostraron que los factores Snail1, Snail2 y E47 inducen programas genéticos comunes y específicos, apoyando un papel no redundante de los distintos factores, en particular de Snail1 y Snail2, en la invasión y progresión tumoral. En estudios previos se había caracterizado el mecanismo de represión de Snail1 y puesto de manifiesto diferencias significativas en la afinidad de los factores Snail1 y Snail2 por las cajas-E del promotor de cadherina-E. Sin embargo, se desconocen los mecanismos específicos de represión mediados por Snail2.

    Esta tesis ha analizado los mecanismos transcripcionales utilizados por Snail2 para la represión transcripcional de cadherina-E así como su papel en el proceso de carcinogénesis química. Los estudios bioquímicos mostraron que Snail2 precisa de los dominios SNAG (dominio común a Snail y Gfi-1) y SLUG para el reclutamiento de distintos co-represores, como mSin3A, NCoR y CtBP1.Estos co-represores interactúan entre sí durante la represión transcripcional de cadherina-E. Además, se han identificado diferentes residuos fosforilables de Snail2 in vivo capaces de regular su actividad represora. Finalmente, el análisis funcional de los dedos de zinc desveló que si bien el segundo dedo de zinc de Snail2 es esencial para la represión de cadherina-E, el quinto dedo de zinc tiene una función dependiente del contexto del promotor, modificando la capacidad de represión de Snail2 según la estructura del mismo. Estos resultados señalan diferencias entre los mecanismos de represión transcripcional de Snail1 y Snail2, apoyando las diferencias funcionales entre ambos factores.

    Los estudios de proliferación realizados en la piel de ratones control y Snail2 -/- mostraron que Snail2 es esencial para la proliferación de los queratinocitos in vitro y el programa de diferenciación in vivo. Sin embargo, la ausencia de Snail2 aumenta significativamente el número de lesiones y la progresión maligna de tumores inducidos por carcinogénesis química, mediante el protocolo de DMBA/TPA. El análisis detallado de las lesiones reveló que la ausencia de Snail2 favorece la proliferación e inhibe parcialmente la diferenciación terminal en las lesiones, contribuyendo así a la progresión tumoral. El tratamiento de ratones carentes de Snail2 con antiinflamatorios reduce la progresión maligna de las lesiones inducidas por DMBA/TPA pero no la aparición y el crecimiento de lesiones benignas. Estos resultados sugieren una alteración importante de la respuesta inflamatoria en ausencia de Snail2, que a su vez puede contribuir en la mayor progresión maligna.