Uso de herramientas ómicas para la evaluación del riesgo ambiental de contaminantes emergentes en especies marinas de interés comercial
- Autores: Rocío Colas Ruíz
- Directores de la Tesis: Miriam Hampel (dir. tes.), Pablo Antonio Lara Martin (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Cádiz ( España ) en 2023
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Nestor Etxebarria Loizate (presid.), Araceli Rodríguez Romero (secret.), Marta Susana Silvestre Gouveia Martins (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Ciencias y Tecnologías Marinas por la Universidad de Cádiz
- Materias:
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- Tesis en acceso abierto en: RODIN
- Resumen
La presente tesis doctoral busca evaluar los posibles efectos toxicológicos que pueden tener los contaminantes ‘emergentes’ (CE) en los organismos marinos expuestos a ellos. Estas sustancias llegan a los sistemas marinos a través de los vertidos de aguas residuales, así como las entradas directas procedentes de actividades recreativas, tales como la natación y el baño. Aunque la exposición a estos contaminantes se hace a muy bajas concentraciones, es de forma crónica, por lo tanto, evaluar sus posibles efectos a nivel molecular resulta un paso clave para determinar su toxicidad. Las tecnologías “ómicas” permiten el estudio global de los diferentes niveles biológicos (transcriptoma, proteoma, metaboloma…) desde un punto de vista holístico e integrado. La integración de datos ómicos junto con la fusión de datos de bioconcentración y toxicocinética, es un método extremadamente útil para dilucidar el modo de acción (MoA) de los contaminantes. De este modo, en la presente tesis doctoral se ha implementado el uso y la integración de herramientas ómicas (metabolómica y transcriptómica) para evaluar el efecto toxicológico de dos filtros solares (4-metilbencilideno alcanfor (4-MBC) y sulisobenzona (BP-4)), un repelente de insectos (N,N-Dietil-meta-toluamida (DEET)) y un biocida (triclosán (TCS)) en dos especies marinas de interés comercial, la dorada (Sparus aurata) y la almeja japonesa (Ruditapes philippinarum). Adicionalmente se realizaron estudios de bioconcentración y toxicocinética.
Primero, se realizaron siete experimentos de exposición con los contaminantes y organismos anteriormente mencionados usando un flujo continuo para reproducir escenarios de exposición ambiental bajo condiciones controladas de laboratorio. Tras la aplicación de técnicas analíticas de alto rendimiento se observó que la bioacumulación de los contaminantes es superior en la almeja que, en los peces. Esto evidencia la importancia de tener en cuenta organismos de distintos niveles tróficos para evaluar el potencial de bioacumulación de los contaminantes ambientales. Además, se observó que el filtro solar 4-MBC presentó el factor de bioacumulación (BCF) más alto (368 565 L Kg -1) y la tasa de eliminación más baja (61.65%) que, junto con la persistencia de este compuesto en el medio, son probablemente indicativos de un riesgo potencial para el medio acuático marino que puede llegar a magnificarse a través de la red alimentaria. También se observó que este compuesto sufría varias biotransformaciones (reducción, metilación, hidroxilación…) con el fin de ser excretado, afectando al metabolismo de las drogas y xenobióticos y al del glutatión, llegando a producir estrés oxidativo. Por otro lado, se observó que, aunque el TCS y BP-4 tenían altos BCF en la almeja (1309 y 850 L Kg -1 respectivamente) sus tasas de eliminación también eran altas (97.12 y 99.99%). Sin embargo, la exposición a estos contaminantes produjo, entre otros, alteraciones en el metabolismo de los lípidos lo que puede deberse a su capacidad como disruptores endocrinos. El DEET presentó el BCF más bajo en la almeja (9.9 L Kg -1) y una alta tasa de eliminación (98.85%). El principal impacto de la exposición de este compuesto a nivel transcriptómico se observó en el metabolismo de las drogas, los xenobióticos y en el de los carbohidratos, lo que sugiere que se estaba realizando un gran consumo energético para poder llevar a cabo la excreción del compuesto.
En el músculo de la dorada se observó que tanto el DEET como la BP-4 presentaban bajos BCF (2.6 y 0.7 L Kg -1 respectivamente) mientras que el TCS presentaba un BCF de 113 L Kg -1. Sin embargo, los análisis transcriptómicos en el hígado de las doradas revelaron que tras la exposición a DEET y BP-4, 250 y 371 genes eran expresados diferencialmente, mientras que no se encontraron genes diferencialmente expresados en la dorada tras la exposición a TCS. Tras la integración con los datos metabolómicos realizados en las mismas muestras, se determinó que el DEET causaba en la dorada agotamiento energético a través de la alteración de los metabolismos de carbohidratos y aminoácidos, estrés oxidativo que daba lugar a daños en el ADN, peroxidación lipídica y daños en la membrana celular y apoptosis. También se observó la activación del metabolismo de los xenobióticos, así como una reacción inmune-inflamatoria. Finalmente, la integración de datos multiómicos reveló que la BP-4 causaba en la dorada impacto en el metabolismo energético y oxidación lipídica, así como, impacto en la biosíntesis de las hormonas esteroideas y tiroideas y en el metabolismo de los nucleótidos. En conclusión, esta tesis muestra la utilidad de integrar datos a distintos niveles biológicos y demuestra que el enfoque multiómico desarrollado y aplicado supone una gran ventaja para dilucidar modos de acción de los compuestos estudiados que, con enfoques diferentes, como el uso de una sola herramienta ómica, podrían haberse pasado por alto.
