Respuesta inmune en la infección por Sars-Cov-2
- Autores: Elena Morte Romea
- Directores de la Tesis: Julian Pardo Jimeno (dir. tes.), José Ramón Paño Pardo (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Zaragoza ( España ) en 2022
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Luis del Pozo (presid.), Cristina Seral García (secret.), Jesús Mingorance Cruz (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Medicina por la Universidad de Zaragoza
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: Zaguán
- Resumen
La infección por SARS-CoV-2 ha sido la primera gran pandemia del siglo XXI y ha puesto a prueba al mundo en múltiples sentidos. Conocer la respuesta inmune generada está suponiendo un reto para la población científica. Especialmente, entender mejor la dicotomía entre las vías moleculares que regulan la respuesta inmunológica responsable de la eliminación de la infección y de la patogénesis de la enfermedad. Además, el espectro clínico y evolutivo tan amplio hace pensar en un patrón inmunológico distinto entre infecciones leves-moderadas y graves. Es en estas formas graves donde una respuesta inflamatoria descontrolada podría ser el sustrato de la enfermedad.
Se han propuesto numerosas teorías que explican la fisiopatología de las formas graves y el amplio espectro clínico. Entre ellas se encuentran la variabilidad en el inóculo viral, la susceptibilidad individual genética al virus, posibles deficiencias funcionales en la respuesta inmune innata mediada por interferón I o la variabilidad en la producción de citoquinas.
En otros modelos de infección como la sepsis bacteriana se ha demostrado el papel patogénico de las granzimas (Gzms). Se trata de una familia de serin proteasas producidas por linfocitos T y células natural killer (NK) con actividad citotóxica e inflamatoria. Producidas de forma descontrolada, dan lugar a un estado de hiperinflamación que provoca daño tisular y orgánico, característico de una respuesta desproporcionada a la infección, como en la sepsis o el shock séptico. En modelos animales y humanos, sus niveles se encuentran elevados en este tipo de infecciones, lo cual se ha asociado a un peor pronóstico. Ratones deficientes en GzmA mostraban una mayor supervivencia tras provocarles una infección intraabdominal, con menor expresión de marcadores inflamatorios en suero y líquido peritoneal, sin verse afectado el control de la carga bacteriana. En el caso de la infección por SARS-CoV-2, todavía se desconoce el papel que pueden tener estas proteasas.
En este trabajo hemos analizado múltiples parámetros de la respuesta inmune mediante el análisis de sangre periférica en pacientes valorados en urgencias por COVID-19, comparados con donantes sanos (HDs, del inglés health donors) y otros pacientes atendidos por infecciones respiratorias en las que se descartó SARS-CoV-2 (no-COV-ITR) y otras patologías no respiratorias (ID). Se han estudiado las principales células responsables de la inmunidad viral: monocitos, linfocitos T CD8+ (LTCD8+), NK, y diferentes familias de factores solubles inflamatorios que regulan su actividad: interleuquinas (IL), quimioquinas (CC), granzimas y ligandos de células NK y LTCD8+. Se evalúo su correlación con marcadores analíticos rutinarios (ferritina, PCR y Dímero D). Dentro del grupo de COVID-19, se analizaron las diferencias entre los pacientes afectos de infección leve – moderada frente a grave-crítica.
La hipótesis principal es que la respuesta inmune en pacientes con COVID-19 leve-moderada difiere de aquellos con infección más grave y, por tanto, se podrían diferenciar en función del tipo y/o niveles de marcadores inflamatorios solubles y de la respuesta inmune celular.
Otras hipótesis secundarias son: • La COVID-19 genera una respuesta inmune diferente a la encontrada en otras infecciones respiratorias no provocadas por SARS-CoV-2 pero con un patrón clínico similar y a la de otras patologías sin afectación respiratoria.
• La identificación de patrones inflamatorios puede ayudar a predecir qué pacientes tienen mayor riesgo de fracaso respiratorio y muerte.
• La granzima A extracelular puede ser responsable de la situación de hiperinflamación encontrada en los pacientes más graves de la infección.
El objetivo principal es la caracterización del perfil inmunológico de los pacientes con infección por SARS-CoV-2 al momento de la hospitalización, tratando de encontrar patrones inmunológicos útiles para diferenciar COVID-19 de otras infecciones y predecir la gravedad y el riesgo de muerte.
Se trata de un estudio observacional, descriptivo y analítico multiparamétrico.
Los criterios de inclusión fueron pacientes de dieciocho años o más, valorados en el servicio de urgencias del Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa por sospecha clínica de infección por SARS-CoV-2, confirmada o no por pruebas microbiológicas (PCR, Test de antígenos, serología IgM y/o IgG).
Se seleccionaron 150 pacientes con sospecha de COVID-19 y se escogieron 48 controles sanos adultos que no presentaban sintomatología compatible y en los cuales se descartó esta infección mediante serología.
Las muestras de sangre periférica fueron obtenidas de los participantes en las primeras 24 horas tras valoración en urgencias y antes del inicio de cualquier tratamiento.
Se incluyeron un total de 150 pacientes que cumplían los criterios de selección: 87 de ellos (57.4%) tuvieron una infección por SARS-CoV-2 confirmada microbiológicamente (COVID-19), 27 (17.4%) mostraban clínica, analítica y radiografía compatibles con infección viral pero las pruebas microbiológicas fueron negativas (no-COV-ITR) y en 37 de ellos (24.7%) se descartó la infección y requirieron valoración en urgencias u hospitalización por otros motivos (ID). Se analizaron muestras de 48 sujetos sanos.
En el grupo de infección por SARS-CoV-2 se documentó una intensa activación de LTCD8+ y células NK, lo cual podría justificar parte del daño tisular y la lesión orgánica. Esta activación iba acompañada por la aparición precoz de varios marcadores de control inmunes inhibitorios, con la presencia simultánea de células que producían Gzms y de marcadores de activación, junto con células que no expresaban Gzms, lo que apuntaba a un mantenimiento parcial de su funcionalidad. Éstas y otras características diferenciaban la infección por SARS-CoV-2 de otras infecciones no-COVI-ITR, de HDs y de ID. COVID-19 se caracterizó por una agresiva producción de IL y CC, algunas de ellas con capacidad diagnóstica y pronóstica respecto a otras infecciones y patologías no respiratorias. También la infección por SARS-CoV-2 presentaba una actividad elevada de GzmA y GzmB, mayor a la encontrada en los otros grupos, lo cual podría contribuir al daño citotóxico y ser responsables de la atracción y producción de otras citoquinas. Ferritina, PCR y Dímero D se correlacionaron adecuadamente con otros marcadores inmunológicos sugestivos de infección grave.
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