Estudio piloto de la ligadura quirúrgica del páncreas distal en modelo Murino K-Ras de adenocarcinoma de páncreas
- Autores: Marta Cáceres
- Directores de la Tesis: Fernando Burdio (dir. tes.), Luis Grande Posa (codir. tes.), Rita Quesada Diez (codir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2021
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Joan Francesc Julian Ibañez (presid.), Manuel Serrano Marugán (secret.), María del Carmen Guerra González (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Cirugía y Ciencias Morfológicas por la Universidad Autónoma de Barcelona
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: TDX
- Resumen
Introducción y Justificación Clínica: El adenocarcinoma de páncreas (ADCP) tiene una elevada prevalencia siendo tratable de forma radical en <20% de los pacientes, justificando la investigación en métodos de diagnóstico y tratamiento precoz. Para ello, se han desarrollado en los últimos 15 años modelos murinos modificados genéticamente que reproducen su oncogénesis. El ADCP se desarrolla a partir de lesiones preneoplásicas aún sin capacidad invasora. La ligadura del conducto pancreático principal (PDL) induce una atrofia pancreática exocrina fisiológica a través de la apoptosis; las células acinares son sustituídas por tejido fibroadiposo, con mediación del gen Tp53. Durante el desarrollo del ADCP Tp53 se inactiva, participando en el desarrollo del cáncer. Estos efectos se han descrito tanto en el ámbito clínico como en el experimental. Pero hasta la fecha no hay publicados estudios que describan cómo afecta la inducción de la atrofia al desarrollo de las lesiones preneoplásicas en un modelo de ADCP.
La hipótesis de este trabajo es que la PDL precoz, cuando aún están activos Tp53 y la apoptosis, en un modelo bien definido de ADCP, puede inducir una atrofia exocrina suficiente para evitar la progresión de lesiones preneoplásicas hacia el cáncer. El objetivo fue valorar el efecto de dicha PDL a través del análisis histológico de las lesiones preneoplásicas, y genómico.
En relación a la metodología, la ausencia de estudios similares implicó realizar un estudio piloto. Se diseñó un estudio analítico experimental, prospectivo, unicéntrico, en modelo murino, con una estimación muestral de 88 animales distribuídos en 5 grupos experimentales. Se utilizó el modelo murino Ptf1a-Cre (+/ki); K-ras LSLG12Vgeo (+/ki), desarrollado en el CNIO de Madrid. Se establecieron: 1. El grupo PDL-Kras, al cual se le practicó una PDL selectiva en el lóbulo esplénico del páncreas; 2. El grupo sham- Kras, control de la técnica quirúrgica, al cual se le sometió a una cirugía de disección del istmo pancreático, pero sin PDL; y 3. El grupo control-Kras, al cual no se le sometió a ninguna cirugía, analizando sólo el desarrollo de lesiones preneoplásicas intrínseco al modelo. Se consideraron otros dos grupos control de los fondos genéticos utilizados para el desarrollo del modelo transgénico; los grupos PDL-Cre y PDL-G, sometidos a PDL. Se analizaron al; 1º, 3er y 6º meses postoperatorios (seguimiento máximo: 9 meses de vida) la presencia y número de lesiones preneoplásicas (PanIN 1, 2, 3 y lesiones planas atípicas- AFL-) en el páncreas proximal a la ligadura (PP) y en el páncreas distal (PD; lóbulo esplénico), para cada grupo experimental, así como la expresión génica diferencial. También se analizó el impacto clínico e histológico de la PDL. Para ello, se realizaron análisis: clínicos, bioquímicos, histológicos, y genómicos (utilizando Limma y GSEA). El análisis estadístico se realizó mediante SPSS.
Resultados: En el grupo PDL-Kras se observaron significativamente menos lesiones PanIN 1, 2 y AFL en los PD en comparación con los PP. Los grupos control-Kras y sham-Kras tuvieron un aumento de 7 y 9 veces del riesgo de presentar PanIN 2, 3 y AFL en su PD, respecto al PD de los ratones PDL-Kras. A nivel genómico, se observó una inhibición de la función acinar en los PD del grupo PDL-Kras, así como una sobreexpresión en los PP de genes relacionados con la carcinogénesis del ADCP.
Se concluye así que: 1. La técnica de la PDL en el modelo murino de PDAC considerado es un procedimiento inductor de una atrofia exocrina y de una disminución en el número de lesiones preneoplásicas en el PD ligado en comparación con el PP no ligado. A nivel genómico, podría inhibir la expresión de genes relacionados con la carcinogénesis del ADCP.
