Caracterización bioquímica, funcional y biológica del veneno de Crotalus durissus cumanensis colombiana

• Autores: Ariadna Lorena Rodríguez-Vargas
• Directores de la Tesis: Nohora Angélica Vega Castro (dir. tes.), Adriana Umaña Pérez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Nacional de Colombia (UNAL) ( Colombia ) en 2023
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Biochemical, functional and biological characterization of the Colombian Crotalus durissus cumanensis venom
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
  • Ciencias de la vida
    • Biología animal (zoología)
    • Biomatemáticas
    • Biometría
    • Biofísica
    • Biología celular
    • Etología
    • Genética
    • Biología humana
    • Biología de insectos (entomología)
    • Microbiología
    • Biología molecular
    • Biología vegetal (botánica)
    • Radiobiología
    • Simbiosis
    • Virología
    • Otras especialidades biológicas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: repositorio.unal.edu.co
• Resumen
  • español

    En el veneno de serpientes cascabel predomina la actividad neurotóxica de las fosfolipasas tipo A2 (PLA2) y las miotoxinas de bajo peso molecular, además de los efectos hemocitotóxicos relacionados con proteasas. Se evaluaron las diferencias bioquímicas y biológicas en los venenos de Crotalus durissus cumanensis de tres ecorregiones de Colombia: Magdalena Medio (MM), Caribe (CA) y Orinoquía (OR). Se realizaron SDSPAGE y HPLC, letalidad, desfibrinación, procoagulación y actividades enzimáticas. Se realizó el reconocimiento de los antivenenos, mediante determinación de dosis efectiva (ED), Western blotting (WB) y ELISA. En los tres venenos, se encontraron proteasas y PLA2, incluida la subunidad básica de crotoxina. Solo se detectó crotamina en el veneno de CA. Hubo mayor letalidad, actividad coagulante, actividad fosfolipasa A2 y actividad hialuronidasa para el veneno de MM. Se encontraron diferencias en el reconocimiento de los antivenenos de uso comercial, colombiano y mexicano, por WB e inmunoafinidad.

    Existe variabilidad intraespecífica, considerando las diferencias en la abundancia e intensidad de los componentes, además de la actividad y respuesta a los antivenenos. La lectina tipo C (CTL) del veneno pudo ser aislada parcialmente y aparece unida a una serinoproteasa, al parecer por efecto de su glicosilación. Esta CTL mostró un efecto proliferativo sobre líneas celulares. Se purificó crotamina y se modeló su estructura tridimensional. Se demostró su efecto sobre la línea celular de cáncer de pulmón A549, mostrando un interesante efecto pro-apoptótico. Además, se hizo un docking molecular con una canal de potasio dependiente de voltaje, que también estaría involucrado en su efecto citotóxico. (Texto tomado de la fuente)

  • English

    In rattlesnake venom, the neurotoxic activity of phospholipase A2 (PLA2) and low molecular weight myotoxins predominates, in addition to protease-related hemocytotoxic effects.

    Biochemical and biological differences in Crotalus durissus cumanensis venoms from three ecoregions of Colombia: Magdalena Medio (MM), Caribe (CA) and Orinoquía (OR) were evaluated. SDS-PAGE and HPLC, lethality, defibrination, procoagulation, and enzymatic activities were performed. Recognition of antivenoms was achieved by determination of effective dose (ED), Western blotting (WB) and ELISA. In all three venoms, proteases and PLA2, including the basic crotoxin subunit, were found. Crotamine was only detected in CA venom. There was higher lethality, coagulant activity, phospholipase A2 activity, and hyaluronidase activity for the MM venom. Differences were found in the recognition of commercially used antivenoms, Colombian and Mexican, by WB and immunoaffinity. There is intraspecific variability, considering the differences in the abundance and intensity of the components, as well as the activity and response to antivenoms. The C-type lectin (CTL) of the venom could be partially isolated and appears bound to a serineprotease, apparently due to its glycosylation. This CTL showed a proliferative effect on cell lines. Crotamine was purified and its three-dimensional structure was modeled. Its effect on the A549 lung cancer cell line was demonstrated, showing an interesting pro-apoptotic effect. In addition, a molecular docking with a voltage-gated potassium channel was made, which would also be involved in its cytotoxic effect.