Resumen de Organogénesis, regeneración in vitro y expresión de los genes gus, gfp, pcht28 y PpGlu en tomate de árbol común (Solanum betaceum Cav.)
- español
El cultivo de tomate de árbol (Solanum betaceum Cav.) es un cultivo que, aunque es muy conocido y sus frutos muy consumidos en Colombia, no se encuentra tecnificado, como muchos otros cultivos en el país. Este frutal es susceptible a plagas como mosca blanca y áfidos, y a enfermedades como las causadas por virosis o por hongos, por ejemplo, la antracnosis, enfermedad causada por los hongos Colletotrichum, que causa daños principalmente en el fruto, ya sea antes o después de su cosecha, y también afecta partes jóvenes como flores y primordios foliares. Con miras a la transformación estable de tomate de árbol común para eventualmente poder generar alguna resistencia a enfermedades como la antracnosis, en este trabajo se optimizó la regeneración in vitro de esta especie vía organogénesis obteniéndose un promedio de 18 brotes por explante, en el caso de hojas. Se evaluó la expresión transitoria en hojas de tomate de árbol común in vitro, mediante el plásmido pCambia 1305.2 con el gen reportero gusPlus y la agroinfiltración de hojas en planta, esta última utilizando la cepa EHA105 de Agrobacterium tumefaciens con el plásmido pMDC85, portando los genes para una endoquitinasa (pcht28) o para una β-1,3-glucanasa (PpGlu); hasta la fecha no hay reportes de la evaluación de la expresión transitoria en hojas de tomate de árbol mediante agroinfiltración. Mediante el gen gus se encontró una eficiencia de transformación del 97,5% para la cepa EHA105, con base en el número de explantes gus positivos. Se llevaron a cabo ensayos in vitro para evaluar la expresión de los genes pcht28 y PpGlu en segmentos de hojas de tomate de árbol común, y se encontró un alto sobrecremiento de Agrobacterium y una alta tasa de muerte del tejido in vitro. (Texto tomado de la fuente)
- English
Tree tomato (Solanum betaceum Cav.) is a crop well known and its fruits widely consumed in Colombia, but it is not technified, like many other crops in the country. This fruit tree is susceptible to pests such as whiteflies and aphids, and to diseases caused by viruses or fungi, for example, anthracnose, disease caused by Colletotrichum fungi, which mainly causes damage to the fruit, either before or after harvest, and it also affects the young parts as flowers and leaf primordia. For the purpose of the stable transformation of common tree tomato, in the future, to eventually be able to generate some resistance to diseases such as anthracnose, in this work the in vitro regeneration of this species via organogenesis was optimized, obtaining an average of 18 shoots per explant, in the case of leaves. The transient expression in common tree tomato leaves in vitro was evaluated by means of the pCambia 1305.2 plasmid with the gusPlus reporter gene and the agroinfiltration of leaves in the plant, this last one using the EHA105 strain of Agrobacterium tumefaciens with the plasmid pMDC85, carrying the genes for an endochitinase (pcht28) or for a β-1,3-glucanase (PpGlu). To date there are no reports of the evaluation of transient expression in tree tomato leaves by agroinfiltration. Using the gus gene, a transformation efficiency of 97,5% was found for the EHA105 strain, based on the number of positive gus explants. In vitro assays were carried out to evaluate the expression of pcht28 and PpGlu genes in segments of common tree tomato leaves, and a high overgrowth of Agrobacterium and a high rate of tissue death in vitro were found.
